P(LLA-CL)納米纖維小口徑人工血管的制備及替代犬股動(dòng)脈的可行性研究.pdf

1、目的：探討靜電紡聚左旋乳酸(PLLA)和聚幾內(nèi)酯(PCL)合成P(LLA-CL)納米纖維可降解小口徑人工血管的制備、以及替代實(shí)驗(yàn)犬股動(dòng)脈的可行性。并觀察載肝素涂層或經(jīng)內(nèi)皮化處理的組織工程血管對(duì)移植后通暢率的影響。
　　 方法：人工血管制備部分：利用靜電紡原理制備2--3毫米口徑的P(LLA-CL)人工血管，利用同軸共紡原理制備載肝素涂層的P(LLA-CL)/Heparin人工血管。通過(guò)掃描電鏡(SEM)、透射電鏡(TEM)、力學(xué)

2、性能測(cè)試系統(tǒng)，評(píng)價(jià)P(LLA-CL)人工血管的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)、纖維孔隙分布及力學(xué)性能；通過(guò)肝素緩釋行為分析，觀察P(LLA-CL)/Heparin人工血管中肝素的緩釋情況。
　　 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分：利用取實(shí)驗(yàn)犬股靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)擴(kuò)增后，二期種植P(LLA-CL)人工血管內(nèi)膜，制備內(nèi)皮化P(LLA-CL)人工血管。實(shí)驗(yàn)用畢格犬9只，采用自身對(duì)照法，經(jīng)腹腔注射麻醉后，切取雙側(cè)股動(dòng)脈6厘米，分別原位植入2--3毫米內(nèi)徑的P(LLA-CL)

3、人工血管；載肝素涂層P(LLA-CL)/Heparin人工血管；內(nèi)皮化P(LLA-CL)人工血管。共植入18根P(LLA-CL)納米纖維可降解小口徑人工血管：其中單純P(LLA-CL)人工血管9根(A組)、內(nèi)皮化P(LLA-CL)人工血管4根(B組)、載肝素涂層P(LLA-CL)/Heparin人工血管5根（C組）。術(shù)后給予肌注青霉素抗炎及喂食華法林抗凝，觀察犬雙下肢血管搏動(dòng)、下肢活動(dòng)、切口局部組織反應(yīng)情況；并通過(guò)多普勒超聲和血管造影方

4、法觀察移植血管通暢率，分別于術(shù)后7天、14天、30天取出植入的人工血管進(jìn)行病理切片檢查，以評(píng)價(jià)人工血管組織結(jié)構(gòu)情況。
　　 結(jié)果：人工血管制備部分：P(LLA-CL)人工血管濕態(tài)下其應(yīng)力可達(dá)到21.25±0.35Mpa，應(yīng)變可達(dá)516±19.84％；干態(tài)下應(yīng)力應(yīng)變分別為18.34±0.18Mpa，504±21.62%，該材料制備的血管彈性形變完全可以達(dá)到生物材料人工血管的力學(xué)性能需求。該材料管壁不滲漏，植入前無(wú)需預(yù)凝。
　

5、　 具有肝素緩釋功能的P(LLA-CL)/Heparin小口徑人工血管，在7天內(nèi)肝素釋放量累計(jì)達(dá)到68%左右，較高濃度的肝素緩釋有效地防止了小口徑血管移植后血栓現(xiàn)象的出現(xiàn)，后肝素的緩釋速度逐漸減緩，到第14天緩釋量才接近72%,防止血栓作用減輕。
　　 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分：9只實(shí)驗(yàn)犬有8只完成實(shí)驗(yàn)，其中1只因麻醉過(guò)量死亡。術(shù)后8只實(shí)驗(yàn)犬雙下肢血管均搏動(dòng)良好；存活實(shí)驗(yàn)犬站立行走自如；手術(shù)切口未見(jiàn)明顯紅腫破潰等局部組織炎癥反應(yīng)。

6、　　 術(shù)后多普勒超聲和血管造影方法按照不同時(shí)間段觀察人工血管通暢率，A、B、C三組人工血管早期通暢率分別為75%、75%和100%;中期通暢率：A組和B組通暢率均為25%，C組通暢率為50%；晚期通暢率：A組和B組通暢率為0%，C組通暢率為25%。三組人工血管數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理（卡方檢驗(yàn)），差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。植入30天后取出血管移植物病理切片檢查見(jiàn)：人工血管周圍外層見(jiàn)藍(lán)紫色細(xì)胞遷移至人工血管中間。血管外膜無(wú)鈣化，吻合口周圍及血

7、管材料外表面均可見(jiàn)散在的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，未見(jiàn)明顯的巨噬細(xì)胞及中性白細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　 結(jié)論：(1)利用靜電紡原理制備出的P(LLA-CL)納米纖維小口徑人工血管強(qiáng)度、張力、彈性等理化性能均能達(dá)到人工血管基本要求。P(LLA-CL)納米纖維血管材料具有良好的組織相容性。(2)本實(shí)驗(yàn)內(nèi)皮化P(LLA-CL)人工血管并未顯示其提高通暢率優(yōu)勢(shì)。(3)P(LLA-CL)/Heparin人工血管具有肝素緩釋功能，在保持人工血管通暢率上優(yōu)于單純P