中國孤雌生殖鹵蟲十個地理品系的DNA指紋分析與進化.pdf

1、本文應用RAPD及ISSR兩種分子生物學方法對中國孤雌生殖鹵蟲十個地理品系的DNA指紋進行分析與鑒定,對等位基因和基因座位在孤雌生殖鹵蟲種群中的數量和分布情況、孤雌生殖鹵蟲種群各品系間的遺傳相似系數和遺傳距離、各品系遺傳相似系數的聚類分析、鹵蟲各品系基因組DNA的多態(tài)組成等內容進行了較深入的研究.采用優(yōu)化后的隨機擴增多態(tài)DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,簡稱RAPD)技術,用經篩選的40個10bp

2、隨機引物對中國孤雌生殖鹵蟲十個地理品系的基因組DNA進行擴增,以期從分子水平上了解十個不同地區(qū)的孤雌生殖鹵蟲的遺傳結構,比較它們之間的遺傳差異.在擴增出的422條多態(tài)片段中,其中371條(87.91％)表現為多態(tài),平均每個引物擴增出10.55個位點.以遺傳相似系數所作的聚類分析圖可以把中國孤雌生殖鹵蟲分為三個主要類群:1.新疆巴里坤、青島尕海鹵蟲品系;2.新疆艾比湖鹵蟲品系;3.遼寧、山東、河北鹵蟲品系.ISSR(inter simpl

3、e sequence repeats)也稱錨定簡單重復序列(anchored simplesequence repeats,ASSR),用錨定的微衛(wèi)星DNA為引物,即在SSR序列的3'端或5'端加上2-4個隨機核苷酸,從而保證了引物與基因組DNA中SSR的5'和3'末端結合,通過PCR反應擴增SSR之間的DNA片段.SSR在真核生物中的分布是非常普遍的,并且進化變異速度非?？?因而錨定引物的ISSR-PCR可以檢測到基因組許多位點的差異