二仙湯對卵巢切除大鼠胰島素敏感性的影響及其機制的研究.pdf

1、目的:
　　更年期后女性生理、心理等方面的變化，使體內(nèi)脂肪分布發(fā)生異常，其中以積聚在腰腹部為主，這種以腰腹部為中心的肥胖，被稱為更年期女性“向心性肥胖”。更年期女性向心性肥胖已嚴重危害到更年期女性的身體健康。已有研究表明:它是導致更年期女性2型糖尿病發(fā)生的重要原因之一。中醫(yī)認為更年期后女性向心性肥胖的主要病機是以腎陰陽兩虛為主，濕阻為輔。故此選用了具有溫補腎陽、滋補腎陰，兼能祛濕的二仙湯。西醫(yī)認為，導致更年期女性向心肥胖發(fā)生的主要

2、因素是雌激素分泌減少。因此西醫(yī)選擇了雌激素替代療法來防治更年期女性肥胖，但是長期使用可能會增加更年期后女性患乳腺癌等疾病的機率。關(guān)于中醫(yī)選擇的二仙湯方是否能防治更年期女性向心性肥胖及預防更年期女性向心性肥胖引起的2型糖尿病呢？本實驗基于以上問題來探討二仙湯對卵巢切除大鼠胰島素敏感性的影響及其機制。
　　方法:
　　1.整體水平觀察二仙湯對卵巢切除大鼠胰島素敏感性的影響。
　　40只雌性SD大鼠，卵巢切除術(shù)后第7天，隨機

3、分組，每組8只，共分五組，分別是假手術(shù)組(SHAM)、模型組(OVX)、二仙湯低劑量組(EXDL，30mg/kg)、二仙湯高劑量組(EXDH，60mg/kg)、雌激素組(E2，0.01mg/kg)。假手術(shù)組和模型組給予等量生理鹽水，每天灌胃一次。連續(xù)治療14周后，CT檢測各組大鼠腹腔內(nèi)脂肪及皮下脂肪的相對含量，檢測空腹血糖、血清胰島素水平、糖耐量，并計算各組大鼠的胰島素抵抗指數(shù);應用qPCR技術(shù)，檢測各組大鼠腹腔內(nèi)脂肪中的MCP-1、A

4、diponectin的mRNA相對水平。
　　2.細胞水平探討二仙湯影響卵巢切除大鼠胰島素敏感性的可能機制。
　　制備二仙湯含藥血清，取15只雌性SD大鼠，隨機分為3組，每組5只，分別是對照組（等量生理鹽水）、二仙湯低劑量組(30mg/kg)、二仙湯高劑量組(60mg/kg)。每天灌胃一次。連續(xù)2周后，斷頭取血，室溫靜置2h，1300rpm，4℃，離心10min。給予已分化成熟的3T3-L1脂肪細胞缺氧0h、4h、12h、2

5、4h。應用ELISA法檢測細胞上清液中MCP-1的水平，確定缺氧時間點。隨機分三組:缺氧對照血清干預組(HCSI)、缺氧二仙湯低劑量含藥血清干預組(HEXDLSI)、缺氧二仙湯高劑量含藥血清干預組(HEXDHSI)。缺氧前二仙湯含藥血清預先作用2h，缺氧12h后。應用ELISA法檢測各組細胞上清液中MCP-1的含量。
　　結(jié)果:
　　整體水平實驗結(jié)果:二仙湯可降低卵巢切除大鼠腹腔內(nèi)脂肪含量，降低胰島素抵抗指數(shù)并提高糖耐量，q

6、PCR檢測顯示二仙湯可下調(diào)卵巢切除大鼠腹腔內(nèi)脂肪中MCP-1的mRNA水平、上調(diào)Adiponectin的mRNA水平。
　　細胞水平實驗結(jié)果:3T3-L1前脂肪細胞誘導分化成熟后，體外缺氧0h、4h、12h、24h并ELISA檢測各時間段細胞上清液中MCP-1的濃度結(jié)果顯示:缺氧的最佳時間點是:12h。ELISA檢測二仙湯含藥血清預干預2h，缺氧處理12h后，各組細胞上清液中的MCP-1水平結(jié)果顯示:低、高劑量二仙湯含藥血清預干預