維生素B-,12-高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵過(guò)程優(yōu)化.pdf

1、本論文選用謝氏丙酸桿菌結(jié)合理性育種技術(shù)，分別采用亞硝基胍(NTG)和紫外線(UV)誘變結(jié)合抗代謝抑制劑法成功地得到一株穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株，命名為P.shermaniiN-U-11。在原始的發(fā)酵條件下，高產(chǎn)突變株P(guān).shermaniiN-U-11搖瓶發(fā)酵72h的維生素B12產(chǎn)量(27.06mg/L)較之母株P(guān).shermaniiY-31(15.89mg/L)提高了70.3％。利用單次單因子法確定了該突變株P(guān).shermaniiN-U-11合成

2、維生素B12的最佳碳源為葡萄糖+糖蜜；最佳碳源含量為15％；最佳氮源為玉米漿；對(duì)產(chǎn)維生素B12有促進(jìn)作用的金屬離子按照Ca2+、K+、Fe2+、Al3+、Cd2+、Ba2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+的順序，其促進(jìn)作用依次增強(qiáng)；最適Co2+離子濃度為70mg/L；最適Mg2+離子濃度為10mg/L，并且最適鎂鹽為MgCl2；最佳裝液量為20％；最佳菌齡為16h；最佳接種量為12.5％。通過(guò)單次單因子優(yōu)化，突變株P(guān).sherm

3、aniiN-U-11發(fā)酵72h的維生素B12產(chǎn)量較原始培養(yǎng)條件下維生素B12產(chǎn)量(27.06mg/L)提高了52.2％。利用Plackett-Burman設(shè)計(jì)法從初始pH值、總碳量、W葡萄糖：W糖蜜、玉米漿、KH2PO4、(NH)2HPO4、FeSO4、MgCl2、MnSO4、CaCl2、NaCl和CoCl2的濃度共十二個(gè)因子中篩選出W葡萄糖：W糖蜜、玉米漿、MnSO4和CaCl2四個(gè)因子對(duì)維生素B12的產(chǎn)量影響較大，這四個(gè)因子對(duì)目標(biāo)的