細(xì)胞表面膜蛋白NECL2相互作用蛋白的鑒定及其功能研究.pdf_第1頁(yè)
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1、細(xì)胞表面膜蛋白是溝通細(xì)胞內(nèi)部與外環(huán)境的橋梁,對(duì)于細(xì)胞行使正常的生理功能非常重要。為了在神經(jīng)系統(tǒng)中尋找能夠與蛋白4.1家族和MAGUK家族成員相互作用的細(xì)胞表面膜蛋白,我們以紅細(xì)胞表面糖脂膜蛋白GlycophorinC胞內(nèi)區(qū)為線索,克隆得到一個(gè)新的人cDNA序列,因其編碼的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與Nectin家族成員類似,故命名為NECL2(NectinLikeProtein2)。 經(jīng)表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn),NECL2在多組織中廣泛表達(dá),如腦、心、肝

2、、肺、骨骼肌等。為了解NECL2在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用,通過(guò)原位雜交和免疫組織化學(xué)方法,研究NECL2在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的具體表達(dá)情況,結(jié)果顯示NECL2主要表達(dá)于大腦皮層,海馬多形性細(xì)胞層,齒狀回,小腦蒲肯野細(xì)胞層,紋狀體、腦橋面神經(jīng)核和脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,而在體外原代培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞中,NECL2在神經(jīng)元的胞體和突起部位均有分布。大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC12具有神經(jīng)元樣分化的潛能,在PC12細(xì)胞中轉(zhuǎn)染并過(guò)量表達(dá)NECL2能夠誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生神

3、經(jīng)元樣分化。在神經(jīng)系統(tǒng)中,蛋白4.1家族是一類重要的細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白,我們分別通過(guò)體外蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞免疫熒光共定位實(shí)驗(yàn),證明NECL2能夠與蛋白4.1家組成員DAL-1相互作用,為闡明NECL2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞神經(jīng)元樣分化現(xiàn)象的機(jī)制提供了線索。 鑒于NECL2能在生物體多種組織中表達(dá),曾經(jīng)觀察該基因在腫瘤細(xì)胞中的表型,發(fā)現(xiàn)NECL2能夠誘導(dǎo)急性粒性白血病細(xì)胞系NB4發(fā)生凋亡,為進(jìn)一步探索該現(xiàn)象的分子機(jī)制,利用酵母雙雜交技術(shù)

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