甘草中黃酮類有效成分的提取、含量測(cè)定和抗氧化性研究.pdf

1、甘草中的主要有效成分為皂苷類和黃酮類,異甘草素和甘草素作為黃酮類中兩種重要的化合物,具有抗炎、抗HIV、抗腫瘤等多種藥理作用,因此具有廣闊的開發(fā)及應(yīng)用前景。本課題通過對(duì)甘草中黃酮類化合物的有效富集,參照2010版藥典測(cè)定甘草中甘草酸含量的方法,建立同時(shí)測(cè)定異甘草素和甘草素含量的方法,并對(duì)兩者的抗氧化活性做了進(jìn)一步的研究。
　　1.通過超聲輔助提取甘草中總黃酮并對(duì)其提取工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。實(shí)驗(yàn)以甘草中總黃酮得率為檢測(cè)指標(biāo),采用均勻設(shè)計(jì)

2、法確定甘草中總黃酮的最佳提取工藝條件為:甲醇體積分?jǐn)?shù)70％、超聲時(shí)間30 min、固液比1:20(g/ mL),甘草中總黃酮的最大得率為3.28％。
　　2.采用高效液相色譜法等度洗脫和檢測(cè)波長(zhǎng)時(shí)間序列采樣的方法,同時(shí)測(cè)定甘草中異甘草素和甘草素的含量。具體色譜條件為:色譜柱Hyporsil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm);檢測(cè)波長(zhǎng)時(shí)間序列0~25 min是276 nm,25~70 min是360 mn;流動(dòng)相CH3

3、OH:H2O=45:55(v/v);流速0.8 mL/min;進(jìn)樣量10μL。異甘草素(R2=0.9996)和甘草素(R2=0.9991)具有良好的線性關(guān)系,其平均加樣回收率分別為97.9％和98.3％,RSD分別為1.3％和1.64％。
　　3.采用響應(yīng)曲面法中Box-Behnken研究甲醇體積分?jǐn)?shù)、固液比、超聲時(shí)間對(duì)異甘草素得率的影響,并建立該工藝的二次多項(xiàng)式數(shù)學(xué)模型。最佳提取條件為:甲醇體積分?jǐn)?shù)70％,超聲時(shí)間35 min,

4、固液比1:18(g/mL),異甘草素的最佳得率為0.3％。結(jié)果顯示該回歸模型(R2=0.9446,P<0.0001)線性關(guān)系良好,且具有高度顯著性,可對(duì)異甘草素的得率進(jìn)行有效分析和合理預(yù)測(cè)。
　　4.利用紫外-可見分光光度法,以維生素C和BHT為陽性對(duì)照,研究了異甘草素和甘草素對(duì)羥基自由基、超氧陰離子和DPPH的清除作用。結(jié)果顯示,四種化合物對(duì)三種自由基均具有一定的清除作用,而且維生素C的清除作用最強(qiáng),異甘草素次之,甘草素較差,B