急性創(chuàng)傷性凝血病大鼠模型的建立.pdf

1、背景：
　　在世界范圍內(nèi)，創(chuàng)傷是引起人類死亡的第二大原因。雖然建立了區(qū)域性急救體系并且在創(chuàng)傷治療方面有所提高，但是死亡率仍居高不下。創(chuàng)傷所致的凝血障礙約占創(chuàng)傷后死因的40％。急性創(chuàng)傷性凝血?。═rauma induced coagulopathy,TIC）的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及多個(gè)系統(tǒng)。急性創(chuàng)傷性凝血病并非簡(jiǎn)單的消耗性凝血障礙，而是涉及凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)、組織灌注、炎癥反應(yīng)及血管內(nèi)皮功能等多個(gè)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)平衡的紊亂。但具體機(jī)制仍不明確，

2、存在多種假說(shuō)。因此，建立急性創(chuàng)傷性凝血病小動(dòng)物模型有利于對(duì)其機(jī)制進(jìn)一步深入研究從而指導(dǎo)臨床。本實(shí)驗(yàn)，我們通過(guò)對(duì)大鼠進(jìn)行人為多發(fā)傷，建立了急性創(chuàng)傷凝血病模型，并探討了顱腦外傷（Traumatic brain injury，TBI）后凝血功能異常與銅代謝紊亂的可能關(guān)系。
　　方法：
　　1、大鼠股動(dòng)脈插管采血模型的建立：
　　SD（Sprague-Dawley，SD）大鼠，無(wú)菌條件下分離股動(dòng)脈，結(jié)扎遠(yuǎn)心端、夾閉近心端、剪口

3、、插管、連接三通閥，監(jiān)測(cè)血壓及連續(xù)采集動(dòng)脈血。
　　2、TIC模型建立：
　　SD大鼠，外科開放氣道，行左側(cè)頸動(dòng)脈及股動(dòng)脈插管，持續(xù)監(jiān)測(cè)血壓并通過(guò)股動(dòng)脈導(dǎo)管連續(xù)采血。模型制作：使用止血鉗對(duì)肝臟中右葉、小腸及右下肢骨骼肌鉗夾，行右側(cè)脛腓骨骨折，合并失血性休克。大鼠處死后損傷組織做 HE（Hematoxylin-eosin，HE）染色觀察病理變化，右下肢正斜位片觀察骨折情況。每隔30min采血一次，進(jìn)行連續(xù)凝血功能測(cè)定及血小板監(jiān)

4、測(cè)。
　　3、顱腦創(chuàng)傷凝血病模型的建立
　　采用自由落體顱腦外傷打擊模型。打擊完畢予頸動(dòng)脈插管、氣管插管及股動(dòng)脈插管。每隔30min采血一次，進(jìn)行連續(xù)凝血功能測(cè)定及血小板監(jiān)測(cè)。此外，實(shí)驗(yàn)結(jié)束取大鼠腦組織通過(guò)HE染色進(jìn)行組織學(xué)觀察，石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定血漿中總銅（Cu）。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)股動(dòng)脈插管可同時(shí)實(shí)現(xiàn)短時(shí)連續(xù)多次采血及血壓監(jiān)測(cè)。大鼠行多發(fā)傷處理后，APTT（Activated partial thro

5、mboplastin time，APTT）較0時(shí)刻點(diǎn)及空白對(duì)照組有明顯延長(zhǎng)趨勢(shì)，血小板總體呈降低趨勢(shì)，PT（Prothrombin time，PT）及INR（International normalized ratio，INR）變化不明顯。HE染色顯示大鼠肝臟、小腸明顯的出血，部分肝細(xì)胞呈空泡樣變甚至壞死，骨骼肌纖維斷裂，細(xì)胞水腫，少量細(xì)胞核消失。大鼠顱腦外傷模型結(jié)果表明，TBI后 APTT延長(zhǎng)，血小板計(jì)數(shù)減少，且血漿總銅濃度水平降低。