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1、目的：構(gòu)建TACE基因金屬蛋白酶區(qū)原核表達載體,在大腸桿菌中高效表達該蛋白并進行分離純化,并在實驗過程中認(rèn)識原核表達的一些特點和存在問題,探索提高表達效率的途徑.方法：用RT-PCR方法獲得人TACE基因金屬蛋白酶區(qū)片段,通過菌落PCR、酶切和DNA測序鑒定陽性克隆,然后將其插入到多種原核表達載體,篩選出能高效表達的重組表達質(zhì)粒.結(jié)果：陽性重組子在大腸桿菌BL-21中經(jīng)IPTG誘導(dǎo)可高效表達TACE金屬蛋白酶區(qū)蛋白,并經(jīng)SDS-PAGE
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