核受體PPARγ與一種新型選擇調(diào)控劑的結(jié)構(gòu)和功能研究.pdf

1、目的：研究核受體PPARγ與一種新型選擇調(diào)控劑的結(jié)構(gòu)和功能。
　　方法：通過前期篩選實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)一種天然產(chǎn)物白屈菜紅堿(Chelerythrine，CHE)是PPARγ的特異性配體。以PPARγ的完全激動(dòng)劑TZD類藥物作為實(shí)驗(yàn)對照，發(fā)現(xiàn)CHE對PPARγ親和力介于羅格列酮(rosiglitazone，Rosi)與吡格列酮(piglitazone，Pig)之間，而不同于兩者的是其轉(zhuǎn)錄激活作用微弱，顯示出CHE與TZD類藥物相比對PPAR

2、γ調(diào)節(jié)機(jī)制的不同。通過對PPARγ/CHE復(fù)合物晶體進(jìn)行三維結(jié)構(gòu)解析，并且與PPARγ/Rosi復(fù)合物三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較，從結(jié)構(gòu)生物學(xué)的角度揭示了CHE和PPARγ的特殊結(jié)合模式。與Rosi相比，CHE和PPARγ的結(jié)合導(dǎo)致了PPARγ第十二條螺旋結(jié)構(gòu)即AF-2結(jié)構(gòu)的松散，這種構(gòu)象上的變化直接影響了CHE介導(dǎo)的PPARγ對輔因子的結(jié)合，產(chǎn)生了不同于TZD類藥物的輔因子結(jié)合模式，主要表現(xiàn)在輔激活因子的募集能力以及輔抑制因子的解離能力都減弱。

3、另外，在肥胖型糖尿病小鼠db/db小鼠中，CHE能在不引起小鼠體重增加等副作用的情況下降低小鼠血糖、提高小鼠體內(nèi)胰島素敏感性，這體現(xiàn)了CHE作為PPARγ選擇性調(diào)控劑相較于Rosi的優(yōu)勢。
　　結(jié)果：體內(nèi)外磷酸化實(shí)驗(yàn)證明了CHE是通過抑制PPARγ第273位絲氨酸的磷酸化作用來改善糖尿病小鼠體內(nèi)的胰島素敏感性。
　　結(jié)論：天然產(chǎn)物CHE是PPARγ的選擇調(diào)控劑，能夠有效改善Ⅱ型糖尿病并且降低副作用，這也為將來開發(fā)以PPARγ