雪茶多糖的提取、分離、純化及組分的研究.pdf

1、本文對雪茶多糖的浸提、分離、純化工藝及其單糖組分等進(jìn)行了研究，結(jié)果如下： 1.雪茶多糖的熱水浸提工藝優(yōu)化：采用正交實(shí)驗(yàn)對提取溫度、提取時(shí)間、提取溶劑用量、提取次數(shù)等工藝參數(shù)進(jìn)行篩選優(yōu)化。確定熱水提取的工藝條件為：浸提溫度80℃、固液比1：5，浸提次數(shù)2，浸提時(shí)間45min。 2.乙醇沉淀及乙醇分級沉淀工藝研究在多糖的乙醇沉淀過程中，通過探討浸提液濃縮比和乙醇加量對多糖沉淀率的影響，發(fā)現(xiàn)將浸提液濃縮為原體積的1/3，乙醇濃

2、度為80％時(shí)，沉淀率最大，達(dá)到87.85％，沉淀中多糖的含量為20.08％。通過對乙醇分級沉淀所得的各組分糖含量的測定，發(fā)現(xiàn)多糖主要集中在30％-40％乙醇沉淀部分。因此乙醇分級沉淀法可初步分離純化多糖。 3.除蛋白質(zhì)方法的比較本文采用了傳統(tǒng)的Sevag法和3％三氯乙酸法除雪茶多糖提取物中蛋白類成分。前者的蛋白質(zhì)清除率為92.56％、多糖損失率為50.12％，后者的蛋白質(zhì)清除率為93.24％、多糖的損失率為68.76％。確定采用

3、Sevag法。 4.大孔樹脂純化雪茶多糖：在10種大孔吸附樹脂中優(yōu)選出了AB-8大孔吸附樹脂。詳細(xì)研究AB-8大孔吸附樹脂純化雪茶多糖的過程，確定層析條件為：上柱溶液pH=9，洗脫速度=2ml/min(柱體積30mm×300mm)，溫度=40℃，NaCl濃度=0.4mg/ml。 5.雪茶多糖的提取、純化工藝的建立：通過研究建立了一套可用于雪茶多糖的提取、純化新工藝。雪茶原料(多糖含量為6.54％)，經(jīng)氯仿抽提、熱水浸提、

4、乙醇沉淀(多糖含量20.08％)、乙醇分級沉淀、Sevag法除蛋白質(zhì)、透析、再乙醇沉淀得粗多糖(多糖含量為53.24％)，經(jīng)大孔吸附樹脂純化后，冷凍干燥得到的純化雪茶多糖(多糖含量為86.84％)。 6.雪茶多糖的DEAE-纖維素分離取純化雪茶多糖上DEAE-纖維素柱，分別用H2O，0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5摩爾/L的NaCl溶液洗脫，流速2ml/min，6ml/管，用苯酚-硫酸法檢測，結(jié)果水洗脫得一種中性