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文檔簡介
1、目的:
采用RNA干擾技術(shù)抑制胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein related protein1,IGFBP-rP1)基因表達(dá)后,觀察鼻咽癌細(xì)胞系CNE1和CNE-2Z生物學(xué)行為的變化,并探討其可能的分子機(jī)制。
方法:
通過免疫組織化學(xué)法檢測25例鼻咽癌組織和22例慢性鼻咽炎組織中IGFBP-rP1蛋白的表達(dá)情況。將針對
2、IGFBP-rP1基因的特異性siRNA(同時(shí)設(shè)置陰性對照)轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞系CNE1和CNE-2Z,然后采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法鑒定IGFBP-rP1基因的沉默效果,并采用蛋白印跡法檢測各組細(xì)胞中總的細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶(extracellular regulated kinase,ERK)1/2和磷酸化ERK(phosphorylated ERK,p-ERK)的表達(dá)。采用細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和CCK-8法
3、分別檢測干擾IGFBP-rP1基因表達(dá)對鼻咽癌CNE1和CNE-2Z細(xì)胞遷移、侵襲和增殖能力的影響。
結(jié)果:
鼻咽癌組織中IGFBP-rP1蛋白的表達(dá)明顯高于慢性鼻咽炎組織(P<0.05)。特異性siRNA轉(zhuǎn)染后,鼻咽癌CNE1和CNE-2Z細(xì)胞中IGFBP-rP1基因的表達(dá)被明顯抑制(P值均<0.05),細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力均明顯降低(P值均<0.05);同時(shí)兩種細(xì)胞中p-ERK表達(dá)水平明顯下調(diào)(P值均<0.
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