VEGF和ADAMTS1在不育男性精漿中的表達及其與精液參數(shù)相關性分析.pdf

1、背景和目的：
　　不育癥目前已發(fā)展成為了全球性問題，世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization,WHO）的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，在不孕不育夫婦中，50％以上存在男方生殖功能缺陷。導致男性不育的因素眾多，其中若僅表現(xiàn)為精液參數(shù)中前向運動（Progressivemotility,PR）精子的百分率＜32%且病因不明者，稱為特發(fā)性弱精子癥（idiopathicasthenospermia）。目前，特發(fā)性弱精子癥的病因研究仍是生

2、殖醫(yī)學中的熱點和難點。人類精漿中存在多種蛋白酶和細胞因子，它們對精子的運動能力有著一定的調(diào)節(jié)作用。
　　血管內(nèi)皮細胞生長因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）是一種分泌型的糖基化蛋白，由兩個分子量為17-22KD大小的多肽鏈以二硫鍵的方式連接形成，其分子本身具有高度保守性，對熱和酸穩(wěn)定。VEGF是人體內(nèi)的一種多功能細胞因子，能夠強有力地刺激血管內(nèi)皮細胞增生及血管生成。VEGF在人類的生殖系

3、統(tǒng)中，通過受體介導發(fā)揮其生物學效應，促進生殖系統(tǒng)中各器官血管的生成，并參與調(diào)節(jié)血管通透性。在大鼠精子的頂體、尾部頸段、中段及主段均發(fā)現(xiàn)了VEGF受體Flt-1和KDR蛋白的表達，說明精子本身即為VEGF的靶細胞。VEGF在男性精漿中也有一定程度的表達，且當精液中的VEGF水平較高時，其女方的妊娠率也會相應增加。
　　ADAMTS1（adisintegrin-likeandmetalloproteinasewiththrombosp

4、ondintype1motifs）即含Ι型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶，它是一類廣泛存在于細胞外基質(zhì)（extracellularmatrix,ECM）中的Zn2+依賴的分泌型金屬蛋白酶，它可以通過降解brevican、versican和aggrecan等蛋白聚糖分子來參與ECM的重構(gòu)，在人體的卵巢、子宮及泌尿生殖系統(tǒng)中均有不同程度的表達。ADAMTS1可通過阻斷VEGF受體磷酸化來抑制內(nèi)皮增殖和血管新生。同時，ADAMTS1

5、還可活化基質(zhì)糖蛋白Thrombospondin（TSP），而后者有抗血管再生的作用。Agarwal等人發(fā)現(xiàn)，弱精子癥患者精漿中的ADAMTS1的表達水平較高于正常男性。S.E.Aydos等人的研究也指出，精子的數(shù)量與活力均與精漿中ADAMTS1的表達水平呈負相關。
　　ADAMTS1的重要功能之一是抑制血管新生，而VEGF是目前體內(nèi)所知的刺激血管新生的最強因子，但兩者的表達是否相關，迄今尚不完全明確，基于它們對男性生殖系統(tǒng)的調(diào)節(jié)都

6、有著重要意義，推測精漿中VEGF、ADAMTS1表達水平的改變可能影響了精子活力。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測精漿中VEGF、ADAMTS1的表達水平，并分別將其與精液參數(shù)和助孕治療結(jié)局進行相關性分析，探討人類精漿中VEGF、ADAMTS1的表達水平對精子活力的影響。
　　材料與方法：
　　所選取的研究對象為2015年11月-2016年1月期間在鄭州大學第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學中心就診行首次夫精人工授精（artificalins

7、eminationbyhusband’ssperm,AIH）助孕治療的不育患者。其中，實驗組為36名特發(fā)性弱精子癥患者，正常對照組為31名精液分析各項參數(shù)正常且既往有生育史的男性，收集新鮮精液，行常規(guī)精液分析后離心沉淀，吸取上層精漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測兩組患者精漿中VEGF、ADAMTS1的表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組精漿中VEGF的表達水平分別為：77.51±12.47pg/ml、147

8、.05±15.26pg/ml，特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組相比較，精漿中VEGF的表達水平下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　2.特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組精漿中ADAMTS1的表達水平分別為：92.38±16.77ng/ml、46.87±13.12ng/ml，特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組相比較，精漿中ADAMTS1的表達水平升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　3.特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組精漿中VE

9、GF的表達水平與ADAMTS1的表達水平呈負相關（r=-0.433,P＜0.01）。
　　4．特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組精漿中VEGF的表達水平與精液優(yōu)化前的前向運動精子百分率呈正相關（r=0.741,P＜0.01）。
　　5.特發(fā)性弱精子癥組與正常對照組精漿中ADAMTS1的表達水平與精液優(yōu)化前的前向運動精子百分率呈負相關（r=-0.347,P＜0.01）。
　　6.特發(fā)性弱精子癥組和正常對照組的臨床妊娠率分別為1

10、1.11%、12.90%，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　7.特發(fā)性弱精子癥組和正常對照組精漿中的VEGF和ADAMTS1的表達水平與精液優(yōu)化后的前向運動精子百分率無明顯相關性（P＞0.05），二者與臨床妊娠率均無明顯相關性（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.精子活力與精漿中VEGF、ADAMTS1的表達水平有關，特發(fā)性弱精子癥患者精子活力下降與VEGF降低、ADAMTS1升高密切相關。
　　2.精液