蒙山九州蟲(chóng)草的化學(xué)成分和生物活性物質(zhì)的研究.pdf

1、蟲(chóng)草屬[Cordyceps(Fr.)Link]真菌是一大類(lèi)形態(tài)特殊的昆蟲(chóng)病原真菌，僅清水大典就已記載316種。亦有報(bào)道，蟲(chóng)草屬真菌迄今有記載達(dá)350余種。絕大多數(shù)為蟲(chóng)生真菌，在我國(guó)分布有70多種，是藥用真菌的重要來(lái)源，以我國(guó)傳統(tǒng)名貴藥材一冬蟲(chóng)夏草最負(fù)盛名。但天然資源已告枯竭。我們?cè)谘芯慷x(chóng)夏草換代產(chǎn)品的過(guò)程中，于1996年在山東蒙山發(fā)現(xiàn)了一種寄主為豆天蛾(ClanisbilineataWalker)幼蟲(chóng)的野生蟲(chóng)草，經(jīng)中國(guó)科學(xué)院微生物研究

2、所郭英蘭先生鑒定為蒙山九州蟲(chóng)草(Cordyceps kyushuensis Kobayasi)(以下簡(jiǎn)稱(chēng)蒙山蟲(chóng)草)，無(wú)性型為九州輪枝霉菌(skyushuensis Verficillium Kyushue)，為一新種。經(jīng)幾年的努力，現(xiàn)已實(shí)現(xiàn)了蒙山蟲(chóng)草的人工小試栽培，為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。因此，有必要對(duì)蒙山蟲(chóng)草的藥用價(jià)值及其作用機(jī)理進(jìn)行探討，這將為新藥源、新藥材及有關(guān)創(chuàng)新性藥物的發(fā)現(xiàn)與開(kāi)發(fā)提供可能與指導(dǎo)。 本論文以蒙山蟲(chóng)草為材料

3、，運(yùn)用藥物化學(xué)、分析化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等綜合技術(shù)，從藥物作用的物質(zhì)基礎(chǔ)—化學(xué)成分的研究入手，建立國(guó)內(nèi)外尚無(wú)報(bào)道的蒙山蟲(chóng)草的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，進(jìn)而探討它的藥效作用與藥用價(jià)值。 主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： ①蒙山蟲(chóng)草子座和菌絲體干粉中水分含量與蛹蟲(chóng)草子座和冬蟲(chóng)夏草菌絲體干粉中水分含量相近，分別為5.02％、5.44％、5.81％和5.66％；灰分的含量相差略大，分別為2.95％、7.46％、3.48％和4.94％。 蒙

4、山蟲(chóng)草子座和菌絲體的蛋白質(zhì)含量分別為16.23％和18.55％，均低于蛹蟲(chóng)草子座和冬蟲(chóng)夏草菌絲體的19.62[％]和49.34％?？偺堑暮恳跃胖菹x(chóng)草子座最高，為32.58％，其菌絲體的總糖含量為20.47％略低于蛹蟲(chóng)草子座的24.90％，均高于冬蟲(chóng)夏草菌絲體的10.28％。由此可見(jiàn)，蒙山蟲(chóng)草多糖含量高，使其與其它蟲(chóng)草(包括冬蟲(chóng)夏草)在生物活性方面具有可比性。蒙山蟲(chóng)草子座的粗脂肪含量為8.O％，略低于蛹蟲(chóng)草子座的10.5％，蒙山蟲(chóng)草菌絲

5、體的粗脂肪含量為13.0[％]，明顯高于冬蟲(chóng)夏草菌絲體的8.1％。而粗纖維的含量四者大體相當(dāng)，分別為2.9％、3.2％、4.7％和2.7％。 ②蒙山蟲(chóng)草菌絲體和子座中含有豐富的甘露醇，在干菌粉中含量分別為10.84％和6.53％，冬蟲(chóng)夏草菌絲體和蛹蟲(chóng)草子座中甘露醇的含量分別為6.32％和7.80％。 ③測(cè)定結(jié)果表明蒙山蟲(chóng)草菌絲體含有16種氨基酸，不含色氨酸和絲氨酸，子座含有18種氨基酸，其氨基酸種類(lèi)比菌絲體多，兩者均以

6、谷氨酸含量最高，菌絲體的必需氨基酸的含量高于子座的，分別為2.99％和2.38％，菌絲體必需氨基酸占氨基酸總量的66.93[％]，遠(yuǎn)高于子座的34.48[％]，而多數(shù)氨基酸的含量也以菌絲體略高，這些可能與菌絲體培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)豐富有關(guān)，蟲(chóng)草菌營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段氨基酸比生殖生長(zhǎng)階段高應(yīng)是正?，F(xiàn)象。 ④運(yùn)用毛細(xì)管電泳，首次確定了蒙山蟲(chóng)草的發(fā)酵液多糖和菌絲體多糖水解組分。多糖水解組分主要含有葡萄糖、甘露糖和半乳糖，另外還含有少量阿拉伯糖。其中含

7、量高的葡萄糖、甘露糖和半乳糖的比例分別為：發(fā)酵液，葡萄糖：甘露糖：半乳糖=1：1.08：3.72；菌絲體，葡萄糖：甘露糖：半乳糖=1：0.72：0.99。 ⑤應(yīng)用反相高效液相色譜系統(tǒng)測(cè)定蒙山蟲(chóng)草中的5'-核苷酸。在優(yōu)化的色譜條件下對(duì)樣品中六種5'-核苷酸進(jìn)行分離，然后用紫外檢測(cè)器對(duì)各個(gè)色譜峰進(jìn)行分析鑒別，并用外標(biāo)法定量得到準(zhǔn)確可靠的定性定量分析結(jié)果。蒙山蟲(chóng)草中含有5'-UMP、5'-GMP、5'-IMP和5'-AMP四種核苷酸

8、，含量分別為0.4975、0.0133、0.9832和0.0383gg/rag。 ⑥用超臨界CO<,2>萃取技術(shù)提取蒙山蟲(chóng)草子座揮發(fā)油，共分離出50種化合物，鑒定了其中的44種。已鑒定化合物組分占總餾出組分的88％，占色譜總餾出峰面積的98.2％。在子座揮發(fā)油已鑒定的組分中，含量最高的組分是亞油酸，相對(duì)含量58.44％，其次為棕櫚酸，相對(duì)含量20.69％。相對(duì)含量較高的還有油酸(6.82％)、硬脂酸(3.36％)、十七烷酸即珍珠