懷地黃種質(zhì)資源評(píng)價(jià)與新種質(zhì)創(chuàng)制研究.pdf

1、地黃[RehmanniaglutinosaLibosch.]為玄參科地黃屬多年生草本植物，以干燥的塊根入藥，是常見的大宗中藥材。地黃的品種很多，它的分布廣泛，其中在我國河南、山東、山西、陜西等地均有大量生產(chǎn)，但是以河南道地產(chǎn)區(qū)的“古懷慶府”一帶產(chǎn)者最佳，栽培的歷史也最悠久，系著名“四大懷藥”之一。懷地黃因受自然環(huán)境和生產(chǎn)措施的影響，經(jīng)有性雜交和塊根變異，形成了很多地黃栽培品種及其變種，這些栽培品種和變種在其外部的形態(tài)、內(nèi)部的結(jié)構(gòu)、產(chǎn)量和

2、質(zhì)量方面都存在一定的差異。
　　 本研究在前期研究的基礎(chǔ)上，收集建立了8個(gè)懷地黃主栽品種的核心種質(zhì)資源圃，從外部形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、化學(xué)指標(biāo)成分和化學(xué)指紋圖譜對(duì)8個(gè)懷地黃種質(zhì)資源進(jìn)行了評(píng)價(jià)，探討了地黃種質(zhì)劃分的依據(jù)并運(yùn)用中藥化學(xué)指紋圖譜鑒別懷地黃質(zhì)量的方法;并對(duì)主栽品種北京3號(hào)不同產(chǎn)區(qū)的產(chǎn)量和品質(zhì)進(jìn)行了研究，探討了適宜地黃開發(fā)種植的區(qū)域;利用資源圃中8個(gè)懷地黃品種，采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)進(jìn)行雜交，創(chuàng)制了61個(gè)雜交后代，為懷地黃新品種選

3、育奠定了技術(shù)和物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 1、利用直尺測(cè)量和掃描電鏡比較了懷地黃8個(gè)主栽品種葉的形態(tài)特征。根據(jù)葉的長度、寬度及長寬比可以分為大型葉、中型葉和小型葉;根據(jù)葉上下表面氣孔器密度可以分為高密度、中密度和低密度;根據(jù)表皮非腺毛的密度可以分為密毛類和寡毛類兩種類型;不同種質(zhì)懷地黃的非腺毛長度、氣孔器大小也存在著差異，這些也可以作為地黃劃分品種的依據(jù)。
　　 2、利用掃描電鏡比較了懷地黃8個(gè)主栽品種花粉粒的形狀、萌發(fā)溝、表面紋

4、飾的深淺及密度等。不同種質(zhì)懷地黃花粉粒的形狀均為橄欖球形，具有3個(gè)萌發(fā)孔;根據(jù)花粉粒的大小可以將8個(gè)懷地黃主栽品種劃分為大型、中型和小型3種類型，根據(jù)花粉粒網(wǎng)眼密度可將8個(gè)懷地黃主栽品種分為高密、中密和低密度3種類型，因此，花粉粒的大小、表面網(wǎng)眼的密度可以作為地黃種質(zhì)劃分的依據(jù)。
　　 3、采用高效液相色譜法測(cè)定了懷地黃8個(gè)主栽品種的梓醇和毛蕊花糖苷的含量，發(fā)現(xiàn)地黃不同品種的懷地黃梓醇和毛蕊花糖苷的含量差異明顯，其中梓醇的含量是

5、:沁懷(3.70％)＞懷地3號(hào)(3.68％)＞85.5(3.05％)＞生津(2.91％)＞北京3號(hào)(2.55％)＞懷地2號(hào)(2.31％)＞脫毒苗85-5(2.30％)＞北京1號(hào)(2.25％)＞懷地1號(hào)(2.23％);毛蕊花糖苷的含量是:85-5(0.13％)＞北京1號(hào)(0.12％)＞懷地2號(hào)(0.10％)＞生津(0.10％)＞懷地3號(hào)(0.08％)＞懷地1號(hào)(0.06％)＞沁懷(0.04％)＞脫毒苗85-5(0.04％)＞北京3號(hào)(0.

6、03％)。
　　 4、采用高效液相色譜法，優(yōu)化了HPLC技術(shù)條件，建立了懷地黃的化學(xué)指紋圖譜，確定了20個(gè)共有峰，對(duì)不同栽培品種懷地黃的HPLC指紋圖譜進(jìn)行了相似度和聚類分析，為懷地黃品種鑒別和質(zhì)量控制提供了可靠的方法。
　　 5、通過北京3號(hào)在溫縣、獲嘉、新鄉(xiāng)北環(huán)、封丘、山東單縣5個(gè)產(chǎn)區(qū)的對(duì)比試驗(yàn)，從產(chǎn)量上比較5個(gè)產(chǎn)區(qū)差異不顯著，都適宜種植懷地黃;從指標(biāo)成分上分析5個(gè)產(chǎn)區(qū)均符合中國藥典的規(guī)定，可以種植，但是品質(zhì)仍不如道

7、地產(chǎn)區(qū);綜合各項(xiàng)指標(biāo)表明地黃沿溫縣向東，順黃河沖積平原經(jīng)獲嘉、新鄉(xiāng)北環(huán)、封丘到山東單縣，都適宜種植地黃，可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r適當(dāng)發(fā)展。
　　 6、利用資源圃中8個(gè)懷地黃農(nóng)家品種和1個(gè)野生地黃，采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)進(jìn)行雜交，雜交組合共72個(gè)，進(jìn)而探討了雜交組合結(jié)果率、單果結(jié)籽數(shù)、千粒重、正交和反交平均單果結(jié)籽數(shù)和千粒重之間的關(guān)系。結(jié)果表明，不同農(nóng)家品種雜交親緣關(guān)系越遠(yuǎn)結(jié)實(shí)率越高，單果結(jié)籽數(shù)和千粒重相對(duì)也高，正反雜交有一定差異，品種內(nèi)部雜