慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥的機(jī)制研究.pdf

1、第一部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞后并發(fā)癥與腸道菌群相關(guān)性研究
　　目的:探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與腸道菌群的相關(guān)性。
　　方法:本組研究對(duì)象分為四組：正常組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)前組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組。收集各組研究對(duì)象的糞便標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)并計(jì)數(shù)；采用實(shí)時(shí)熒光定量P

2、CR的方法來(lái)比較各組人群腸道主要菌群(乳酸桿菌、雙歧桿菌、擬桿菌、腸桿菌、腸球菌及梭菌)的變化。
　　結(jié)果:本研究在培養(yǎng)的10種腸道主要細(xì)菌中，3組實(shí)驗(yàn)組與正常對(duì)照組比較，腸桿菌、腸球菌、葡菌球菌、酵母菌數(shù)量顯著增多，擬桿菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量顯著減少。而在脾栓塞術(shù)術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥患者中，腸桿菌和腸球菌的數(shù)量較術(shù)前組及術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組明顯增多，雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量顯著減少。Real-time PCR的檢測(cè)結(jié)果提示：與正常人

3、群比較，3組實(shí)驗(yàn)組患者的腸桿菌、腸球菌和梭菌明顯增加，擬桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量顯著減少；各組間乳酸桿菌的數(shù)量沒(méi)有明顯差異。而術(shù)后有并發(fā)癥組中腸桿菌、腸球菌和梭菌的數(shù)量較術(shù)前組及術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組明顯增多，雙歧桿菌的數(shù)量顯著減少。Real-time PCR的檢測(cè)結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果基本一致。
　　結(jié)論:慢性乙型病毒性肝炎肝硬化脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞患者存在腸道微生態(tài)失衡,特別是術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥的患者，菌群失調(diào)更明顯。
　　第二部分慢性乙

4、型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥與炎癥因子及內(nèi)毒素的相關(guān)性研究
　　目的:探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與與炎癥因子及內(nèi)毒素的相關(guān)性。
　　方法:將研究對(duì)象分為三組：正常組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組。在術(shù)前1天、術(shù)后7天及術(shù)后1個(gè)月抽取患者外周靜脈血液，采用ELISA法檢測(cè)LPS、IL-6、IL

5、-8、TNF-α及sICAM-1的表達(dá)。
　　結(jié)果:行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后有并發(fā)癥的患者組，外周血中LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1含量一直高于正常組，且術(shù)后第7天水平明顯高于術(shù)前水平，而術(shù)后1個(gè)月時(shí)與術(shù)前水平無(wú)明顯差異。行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥的患者組，外周血中LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1含量一直高于正常組，但術(shù)后7天及術(shù)后1個(gè)月時(shí)LPS、IL-6、IL-8及TNF-α含量與術(shù)前水

6、平無(wú)明顯差異，而sICAM-1含量在術(shù)后7天時(shí)明顯高于術(shù)前。術(shù)后有并發(fā)癥組的LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1含量在術(shù)后7天時(shí)明顯高于術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組，而在術(shù)后1個(gè)月時(shí)兩組沒(méi)有明顯差異。
　　結(jié)論:術(shù)后一周LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及sICAM-1仍持續(xù)增高可以作為脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與否的參考指標(biāo)。
　　第三部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥與免疫功能相關(guān)

7、性研究
　　目的:探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥與免疫功能的相關(guān)性。
　　方法:將研究對(duì)象分為三組：正常組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組；肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者術(shù)前、術(shù)后1個(gè)月、術(shù)后6個(gè)月、術(shù)后1年及術(shù)后2年的外周血中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞及CD4+CD25+CDl27low/-Treg的表達(dá)變化，采用全自動(dòng)免

8、疫分析儀測(cè)定免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）的含量。
　　結(jié)果:流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后有并發(fā)癥的患者組，外周血中CD3+和CD8+T細(xì)胞的量開(kāi)始低于正常水平，后期逐漸恢復(fù)正常水平，但CD4+T細(xì)胞的含量均低于正常人群。與術(shù)前相比，術(shù)后CD3+、CD4+和CD8+T細(xì)胞含量先降低后升高至正常水平。行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥的患者組，外周血中CD3+、CD4+T和CD8+T細(xì)胞水平術(shù)后早期低于正常水平，后來(lái)逐漸

9、恢復(fù)正常水平。與術(shù)前相比，術(shù)后CD3+、CD4+ T細(xì)胞含量先降低后升高至正常水平，而CD8+ T細(xì)胞與術(shù)前水平比較無(wú)明顯差異。術(shù)后有并發(fā)癥組的CD3+、CD4+和CD8+T細(xì)胞含量在術(shù)后早期明顯低于術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組，后期兩組間無(wú)明顯差異。各組患者中CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量在術(shù)后1個(gè)月或6個(gè)月時(shí)較正常組及術(shù)前水平明顯增高，隨后會(huì)逐漸恢復(fù)至正常水平。術(shù)后有并發(fā)癥組的CD4+CD25+CDl27low/-Treg含

10、量在術(shù)后1個(gè)月和6個(gè)月時(shí)明顯高于術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組的CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量，隨后各時(shí)間點(diǎn)兩者之間無(wú)明顯差異。免疫球蛋白檢測(cè)結(jié)果顯示各組患者在術(shù)前及術(shù)后各時(shí)間段的IgA、IgG、IgM含量與正常水平?jīng)]有明顯差異，各組間也沒(méi)有明顯差異。
　　結(jié)論:慢性乙型病毒性肝炎肝硬化脾亢患者行部分脾栓塞術(shù)對(duì)機(jī)體免疫功能只是產(chǎn)生短期的影響,特別在有并發(fā)癥的患者中早期影響更明顯，但后期患者的免疫功能會(huì)逐漸恢復(fù)正常，該結(jié)果提示