阿托伐他汀治療慢性硬膜下血腫的基礎與臨床研究.pdf

1、背景和目的：
　　慢性硬膜下血腫(CSDH)發(fā)病機理尚不明確，高滲學說已遭否定，纖溶亢進和包膜出血學說尚缺乏可靠依據(jù)，而CSDH的非手術治療仍無有效手段。本課題前期研究顯示：大鼠硬膜下血腫吸收與血腫包膜新生血管密切相關，藥物干預下調內皮祖細胞（EPC）水平可使血腫吸收延遲；臨床檢測發(fā)現(xiàn)多數(shù)CSDH患者EPC水平低于正常。提示，CSDH形成、吸收可能與EPC介導包膜血管生成、修復相關。本課題擬探明CSDH發(fā)病機理，找出影響CSDH形

2、成和轉歸的主要因素，提出相關調控方法，為建立臨床防治CSDH的新策略奠定基礎。
　　方法：
　　基礎實驗部分：通過鼠尾膠原硬膜下血腫造模，混入VEGF因子，檢測比較血腫體積、血腫包膜組化、外周血中EPC水平及血腫VEGFR-1,VEGFR-2，Ang-1,Ang-2 and Tie-2表達等變化。通過改良大鼠硬膜下造模，并且按照口服Atorvastatin（阿托伐他?。┑牟煌瑒┝?，將實驗動物分為3組：對照組（saline-t

3、reated）、小劑量組（3mg/kg/day）以及大劑量組（8mg/kg/day）。利用MRI觀察大鼠血腫體積動態(tài)變化。應用HE染色、透射電鏡、免疫組化、流式細胞、實時定量 PCR、ELISA技術分別測量造模后不同觀察點新生血腫包膜病生理結構特點、外周血內皮祖細胞數(shù)量、新生血管及平滑肌樣細胞密度、外周血及血腫包膜血管生成相關因子VEGF、TGF-β、MMP-9以及Ang-1/2的表達變化，以及炎癥相關因子（TNF-α,IL-6以及IL

4、-10）表達。動態(tài)檢測大鼠的行為學變化，分析相關干預因素之間的關系。
　　臨床實驗部分：觀察實驗中，收集臨床慢性硬膜下血腫鉆孔術患者的外周血行流式EPC檢測，并行預后分析。干預實驗中，收集年齡≧18歲，＜90歲，MGS-GCS（The Markwalder Chronic Subdural Haematoma Scale Grade）分級為2級（包括2級）以下、短時間內不會發(fā)生腦疝，無立即手術處理必要的CSDH患者，進行口服Ato

5、rvastatin志愿者治療，方法為20mg/晚，持續(xù)1月～12月。選擇服藥后第1、3月復查影像，隨訪2年者每年復查影像。服藥期間定期復查肝功能并門診隨訪其可能副作用。所有患者禁止應用糖皮質激素、促進血循環(huán)和其他可能影響血管生成的藥物。若患者突發(fā)意識狀態(tài)惡化、血腫量增多、腦疝風險增大等，則及時轉為手術治療。統(tǒng)計患者基本流行病學資料，計量治療前后血腫量變化，以MGS-GCS級，日常生活能力評估（Activities of Daily Li

6、fe-the Barthel Index scale，ADL-BI）對患者療效進行綜合評價，并統(tǒng)計患者治療時間與花費。
　　結果：
　　基礎實驗部分，正常大鼠經造模后，外周血EPC經歷先增高后逐步下降，至造模后6天左右回落到正?；€水平。其中死亡大鼠的外周血EPC水平造模后經歷短暫升高后，迅速下降至正常基線水平以下。VEGF干預實驗中，不同那個時間點VEGF組的血腫新生包膜上的新生血管較對照組有較多不連續(xù)的內皮細胞層，且血腫

7、體積要明顯大于空白組。Atorvastatin干預實驗中顯示，7天時小劑量Atorvastatin組大鼠血腫吸收明顯快于對照組、大劑量組，而對照組與大劑量組血腫體積無統(tǒng)計學差異；大、小劑量組外周血EPC水平明顯高于對照組，且大劑量組高于小劑量組；小劑量組包膜血管相關因子表現(xiàn)為VEFG、TGF-β、MMP-9低表達，且Ang-1/Ang-2比值顯著高于對照組及大劑量組。通過與采用生理鹽水治療的對照組相比，實驗組中Atorvastatin并

8、沒有改變IL-10的基因和蛋白水平的表達，但是卻明顯減低了TNF-α和IL-6的基因和蛋白水平的表達以及VEGF基因的表達。
　　臨床試驗部分：CSDH患者血清中EPC水平低于健康志愿者對照組人群平均水平，并且手術后復發(fā)患者的EPC水平，明顯低于手術后未復發(fā)者。23例Atorvastatin保守治療CSDH患者中，除1例患者行Atorvastatin保守治療期間出現(xiàn)明顯神智狀態(tài)惡化、血腫增大，轉為行鉆孔血腫引流術外，其余22例患者

9、口服Atorvastatin時間1~12個月（3.976±3.505月）。服藥前硬膜下血腫體積平均為47.38±18.50 ml；1月后血腫體積明顯縮小為17.05±14.05ml，神經體征及MGS-GCS分級情況較服藥前明顯好轉；3月后，15例患者（71.4％）血腫完全吸收，6例患者（28.6%）血腫吸收平均超過71.38%±11.86%。
　　結論：
　　硬膜下血腫的吸收速度不但與血腫包膜新生血管數(shù)量相關，更與包膜中成熟