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1、糞臭素即3-甲基吲哚,有極強的糞臭味,是人和動物體內(nèi)色氨酸的代謝產(chǎn)物,人攝取的很多食物中(如多種肉類等)本身也含有糞臭素。糞臭素對人、動物及環(huán)境均有一定的危害作用,含有糞臭素或可以轉(zhuǎn)變?yōu)榧S臭素的外源性食物進入體內(nèi)后,糞臭素將不可避免地與動物和人體內(nèi)的消化酶發(fā)生作用,人和動物通過皮膚吸收的來自外界環(huán)境中的糞臭素也有可能與體內(nèi)的消化酶發(fā)生作用,因此我們研究了糞臭素對幾種重要消化酶部分性質(zhì)的影響。我們選擇了在消化淀粉和糖類物質(zhì)中起重要作用的α
2、-淀粉酶以及在蛋白質(zhì)消化過程中起主要作用的胃蛋白酶和胰蛋白酶。本文首先研究了糞臭素對α-淀粉酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶活性的影響,接著通過紫外光譜法和熒光光譜法進一步研究了糞臭素對這三種重要消化酶結(jié)構(gòu)的影響。 研究發(fā)現(xiàn)糞臭素對三種消化酶均有一定程度的抑制作用,其對胰蛋白酶的抑制率最高,對胃蛋白酶的抑制率最低。當糞臭素與酶的終濃度比為5/1時,糞臭素對這三種酶的抑制率分別達到32.4%、28.7%及26.6%。 當向三種消
3、化酶中加入不同濃度的糞臭素時,隨著糞臭素濃度的增加,α-淀粉酶在265 nm附近、胃蛋白酶在275 nm附近及胰蛋白酶在270 nm附近的紫外吸收峰均有一定程度的升高。 通過實驗我們得知糞臭素對三種消化酶的內(nèi)源熒光均有很強的猝滅作用,根據(jù)Stem-Volmer方程作糞臭素對三種消化酶猝滅的F<,0>/F~[Q]曲線,可得出糞臭素對α-淀粉酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶的的表觀猝滅常數(shù)Kq分別為2.42×10<'12>L/mol·s、1
4、.93×10<'12> L/mol·s及2.72×10<'12> L/mol·s,遠遠大于各種猝滅劑對生物大分子的最大擴散碰撞常數(shù)2.0×10<'10> L/mol·s,表明糞臭素對三種酶的熒光猝滅并不是由于分子擴散和動態(tài)碰撞引起的,很可能是由于有機小分子糞臭素“鑲嵌”于酶分子之間,彼此結(jié)合形成了某種特定結(jié)構(gòu)的締合物而引起的靜態(tài)猝滅。以lg[(F<,0>-F)/F]對lg[Q]作線性擬合,即可求出糞臭素與三種酶的結(jié)合常數(shù)K和結(jié)合位點數(shù)n
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