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文檔簡(jiǎn)介
1、周?chē)窠?jīng)損傷后的修復(fù)和再生一直是神經(jīng)科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。對(duì)于長(zhǎng)段周?chē)窠?jīng)缺損,很難通過(guò)外科手術(shù)將其直接縫合修復(fù)。自體神經(jīng)移植是修復(fù)長(zhǎng)段周?chē)窠?jīng)缺損的黃金標(biāo)準(zhǔn),但由于其存在來(lái)源受限和需要二次手術(shù)取出等問(wèn)題,所以并不是最佳的治療方案。近年來(lái),隨著組織工程的發(fā)展,周?chē)窠?jīng)損傷后的修復(fù)和再生有了新進(jìn)展,神經(jīng)導(dǎo)管用于修復(fù)長(zhǎng)段周?chē)窠?jīng)缺損的優(yōu)勢(shì)逐漸被人們了解。
本文采用天然高分子材料殼聚糖(chitosan,CS)與絲素蛋白(silk f
2、ibroin,SF)為原料,通過(guò)控制二者體積比、濃度、凍干溫度等參數(shù),利用冷凍干燥法合成均勻多孔的多種絲素蛋白/殼聚糖(SF/CS)導(dǎo)管用于長(zhǎng)段周?chē)窠?jīng)損傷的修復(fù)。通過(guò)研究導(dǎo)管的徑向抗壓性能、變形恢復(fù)性能和體內(nèi)降解性能等,進(jìn)一步優(yōu)化導(dǎo)管的組分比例及濃度,篩選出最優(yōu)配方的SF/CS導(dǎo)管。再將人源性正常肝癌細(xì)胞HL7702細(xì)胞與不同濃度的SF/CS導(dǎo)管浸提液共培養(yǎng)后,用MTT比色法檢測(cè)導(dǎo)管材料的細(xì)胞毒性。最后,培養(yǎng)大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(
3、PC12細(xì)胞),將其接種到SF/CS導(dǎo)管上共培養(yǎng)后,研究細(xì)胞在導(dǎo)管孔隙表面的生長(zhǎng)狀況。
冷凍干燥后得到多種外觀較好的SF/CS導(dǎo)管,其中SF/CS混合液濃度為5%、6%和7%,CS與SF體積比在1:1到3:1之間。所合成的SF/CS導(dǎo)管外直徑約6mm,內(nèi)直徑約3mm,長(zhǎng)約45mm,孔隙率約60-70%。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),SF/CS混合液濃度較低或者殼聚糖成分較高的SF/CS導(dǎo)管的降解速度較快。在相同CS/SF體積比時(shí),隨著SF/
4、CS混合液濃度的升高,導(dǎo)管的徑向抗壓性能和變形恢復(fù)性能增強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,混合液濃度為6%,CS/SF體積比為2:1的SF/CS導(dǎo)管具有較優(yōu)的理化性能。MTT結(jié)果顯示此導(dǎo)管沒(méi)有細(xì)胞毒性。將其與 PC12細(xì)胞共培養(yǎng)后,掃描電鏡結(jié)果圖表明,PC12細(xì)胞能在SF/CS導(dǎo)管上貼附生長(zhǎng),狀態(tài)良好。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,制備得到的SF/CS導(dǎo)管在多孔結(jié)構(gòu)、力學(xué)強(qiáng)度、體內(nèi)降解性以及生物相容性等方面均表現(xiàn)良好,在周?chē)窠?jīng)組織工程中有潛在的應(yīng)用前景。
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