愛(ài)羅咳喘寧對(duì)COPD肺氣虛大鼠IL-8、TNF-α和MIP-2水平及MUC5AC、AQP5基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　觀察愛(ài)羅咳喘寧方對(duì)慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)肺氣虛證大鼠模型肺功能，血漿、肺組織勻漿和支氣管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、腫瘤壞死因子-α(Tumor neerosis faetor-alpha,TNF-α)、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-2

2、(Macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)含量，肺組織病理，黏蛋白5AC(Mucin5AC,MUC5AC)及水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)基因表達(dá)的影響，探究愛(ài)羅咳喘寧對(duì) COPD肺氣虛證治療的作用及其機(jī)制，給愛(ài)羅咳喘寧方的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為開(kāi)發(fā)治療COPD的中藥提供新思路。
　　方法：
　　將60只Wistar大鼠隨機(jī)分成6組，分別為正常對(duì)照組，模型組，愛(ài)羅咳喘

3、寧低劑量（7.76 g·kg-1·d-1）組、中劑量（15.52 g·kg-1·d-1）組、高劑量（31.04 g·kg-1·d-1）組和急支糖漿（3 ml·d-1）組，每組10只。以煙熏加氣管內(nèi)滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)制備COPD穩(wěn)定期肺氣虛證大鼠模型，分別給予相應(yīng)藥物干預(yù)；觀察并記錄大鼠一般狀況，檢測(cè)肺功能并取材。酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)大鼠血漿、肺組織勻漿和支氣管肺泡灌洗液中IL-8、TNF-α、MIP

4、-2的含量，光鏡下觀察大鼠肺組織結(jié)構(gòu)，原位雜交和免疫組化檢測(cè)肺組織中MUC5AC、AQP5基因mRNA和蛋白表達(dá)。有關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用
　　SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。
　　結(jié)果:
　　本研究制備COPD穩(wěn)定期肺氣虛證大鼠模型，以肺功能和病理學(xué)改變作為判定模型大鼠復(fù)制成功的依據(jù)。與正常組比較，模型組大鼠潮氣量(TV)、呼氣峰流速(PEF)、50％潮氣量呼氣流量(EF50)較正常組均明顯降低（P＜0.01或 P＜0.0

5、5）；血漿 IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著高于正常組（P＜0.01或P＜0.05），肺組織勻漿IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著高于正常組（P＜0.01或P＜0.05），支氣管肺泡灌洗液IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著高于正常組（P＜0.01或P＜0.05）；模型組氣管和肺組織中MUC5AC mRNA和蛋白表達(dá)均顯著增強(qiáng)，AQP5 mRNA和蛋白表達(dá)均顯著減弱，模型組MUC5AC蛋白和AQP5蛋

6、白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(氣管r=-0.528，P＜0.01；
　　肺組織r=-0.532，P＜0.01)。與模型組比較，愛(ài)羅咳喘寧低、中、高劑量組及急支糖漿組大鼠TV、PEF和EF50均顯著升高（P＜0.01或P＜0.05）；血漿中IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著低于模型組（均P＜0.01），肺組織勻漿IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著低于模型組（P＜0.01或P＜0.05），BALF中IL-8、TNF-ɑ和MI

7、P-2因子含量均顯著低于模型組（均 P＜0.01）；愛(ài)羅咳喘寧中劑量組氣管和肺組織中MUC5AC mRNA和蛋白表達(dá)均顯著減弱，AQP5 mRNA和蛋白表達(dá)均顯著增強(qiáng)，中劑量組 MUC5AC蛋白和AQP5蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(氣管 r=-0.485，P＜0.05；肺組織r=-0.491，P＜0.01)。模型組支氣管管腔內(nèi)出現(xiàn)滲出物，細(xì)支氣管上皮有多處變性、壞死，管壁各層炎細(xì)胞浸潤(rùn)顯著；黏膜下層黏液腺有增生、擴(kuò)張；細(xì)支氣管及其周?chē)闻葜谐霈F(xiàn)較

8、大面積炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，可見(jiàn)局限性肺不張，病灶周?chē)霈F(xiàn)肺大泡。與模型組比較，愛(ài)羅咳喘寧低、中、高劑量組及急支糖漿組的病理學(xué)改變相對(duì)較輕，中劑量組修復(fù)最為明顯。
　　結(jié)論：
　　1、愛(ài)羅咳喘寧能增強(qiáng)COPD肺氣虛大鼠肺通氣和換氣功能，改善COPD穩(wěn)定期大鼠肺氣虛癥狀。
　　2、愛(ài)羅咳喘寧可顯著減輕COPD肺氣虛大鼠炎癥反應(yīng)，修復(fù)肺組織損傷，改善肺氣虛癥狀。其機(jī)制可能通過(guò)抑制細(xì)胞因子IL-8、TNF-ɑ和MIP-2的分泌，阻止