小鼠X染色體性發(fā)育啟動(dòng)數(shù)量性狀基因座(QTL)的精細(xì)定位.pdf

1、性發(fā)育是指?jìng)€(gè)體性成熟并獲得生殖能力的過程,受到遺傳、環(huán)境等多種因素的影響。下丘腦-垂體-性腺軸系統(tǒng)控制著人類生殖系統(tǒng)的發(fā)育、成熟及功能的維持,對(duì)哺乳動(dòng)物性發(fā)育起著決定性的作用,其所分泌的各種激素水平直接影響或調(diào)控青春期發(fā)育。性發(fā)育的啟動(dòng)時(shí)間是性發(fā)育過程中相當(dāng)關(guān)鍵的一個(gè)性狀。該性狀是一個(gè)復(fù)雜性狀,在個(gè)體水平上受多種遺傳因素和環(huán)境因素的影響。有研究表明X染色體存在與性發(fā)育啟動(dòng)相關(guān)的調(diào)控基因。我們之前的研究在小鼠X染色體確定了一個(gè)和小鼠陰門開

2、啟相關(guān)的~25cM(DXMit103~DXMit119,LOD=3.86)的QTL區(qū)段。本研究利用特異性區(qū)段同類系的家系構(gòu)建策略將該QTL精細(xì)定位到~2.5cM(DXMit68~RS29053133(50~60Mb))的區(qū)間長度內(nèi)。本實(shí)驗(yàn)選擇性發(fā)育起始時(shí)間差異較大的兩種近交品系小鼠C3H/HeJ和C57BL/6作為親本,親本通過正反交產(chǎn)生F1代,F1代自交產(chǎn)生F2代,針對(duì)初步定位確定的X染色體目標(biāo)QTL區(qū)段通過基因分型篩選在該區(qū)段內(nèi)至少

3、發(fā)生1次重組的F2代雄鼠個(gè)體。篩選出的F2代雄鼠個(gè)體與C3H/HeJ雌性親本回交產(chǎn)生F3代,F3代雌性個(gè)體與C3H/HeJ雄性親本回交產(chǎn)生F4代,篩選在目標(biāo)區(qū)段內(nèi)發(fā)生一次重組的F4代雄性個(gè)體構(gòu)建特異性區(qū)段同類系。我們成功構(gòu)建了13種針對(duì)目的區(qū)段的同類系以及1種對(duì)照同類系(F5雌鼠個(gè)體基因型為XC3XC3)。篩選出的F4代雄性個(gè)體與C3H/HeJ雌性親本回交產(chǎn)生F5代,記錄F5代雌鼠的性發(fā)育啟動(dòng)(陰門開啟)時(shí)間。通過統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS

4、15.0對(duì)基因型表型數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA),將目標(biāo)QTL精細(xì)定位到區(qū)間DXMit68~RS29053133(50~60Mb)內(nèi)。對(duì)精細(xì)定位獲得的QTL區(qū)段進(jìn)行候選基因分析,初步確定有三個(gè)基因可能參與了性發(fā)育啟動(dòng)的調(diào)控;Pgrmcl(progesterone receptormembrane component 1,孕酮受體膜蛋白組分元件),Gria3(谷氨酸受體),Plac 1(Placental spec