ABR系統(tǒng)微生物群落的SSCP基因指紋分析.pdf

1、產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸菌群的產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸作用直接限制著后續(xù)產(chǎn)甲烷功能作用的強度，但關于產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸菌及其生理生態(tài)學研究成果甚少，本論文應用分子生物學技術PCR-SSCP并結合對工藝運行狀態(tài)的分析對厭氧折流板反應器中微生物群落進行研究。
　　研究表明，ABR穩(wěn)定期微生物群落結構不隨運行時間的延續(xù)而改變。ABR運行穩(wěn)定期微生物菌群沿水流方向出現(xiàn)明顯的群落更迭現(xiàn)象。產(chǎn)酸相主要以Escherichiasp.等水解發(fā)酵菌群和產(chǎn)酸菌群為主；產(chǎn)甲烷相Anaer

2、olineasp.等菌群共同形成頂級群落，古細菌出現(xiàn)明顯的生態(tài)位分離。真細菌90個克隆分別屬于Chloroflexi等6個門，古細菌75個克隆中95％屬于產(chǎn)甲烷菌群，以Methanobacterium為主。采用Sequencher5.0比較165個測得的克隆子，得到54個不同的OTU，其中37個真細菌OTU，17個古菌OTU。產(chǎn)酸相群落結構明顯較產(chǎn)甲烷相復雜。
　　ABR處于穩(wěn)定運行狀態(tài)時，第五格室為HPA功能格室。
　　A

3、BR進水COD濃度從328mg/L，逐步提高到4000mg/L的過程中，HPA功能格室中的微生物群落表現(xiàn)出明顯的動態(tài)演替過程。在低負荷啟動期，HPA功能格室的微生物群落多樣性較低，Anaerolineasp.等在穩(wěn)定運行狀態(tài)形成頂級群落，各優(yōu)勢菌群形成明顯互利共生關系。測得的60個真細菌序列中共得到17個OTU，分別屬于Chloroflexi和Proteobacteria等5個不同的門，10個序列為可利用有機揮發(fā)酸生成H2/CO2和乙酸

4、的HPA菌群。古細菌65個克隆中得到16個OUT，62.5%Methanobacterium、6.25%Methanosarcina和13%Methanogenium。
　　當核酸片段長度約為200bp時，凝膠濃度為12%，丙烯酰胺與N，N′-亞加雙丙烯酰胺的比例為49:1，無甘油，4℃條件下260V電泳17h可得到較理想的SSCP圖譜。BSA的添加有助于降低樣品中殘留腐殖酸等的抑制作用，提高圖譜的分辨率和可讀性，是一種可嘗試的優(yōu)