五味子乙素對人腎小管上皮細胞缺氧損傷的保護作用.pdf

1、目的：本實驗擬從體外水平觀察不同濃度的五味子乙素（Sch B）對氯化鈷（CoCl2）誘導的人腎小管上皮細胞—HK-2細胞缺氧損傷的保護作用，并探討其可能機制。
　　方法：取離體培養(yǎng)的HK-2細胞，隨機分為6組：對照組：細胞不加任何藥物處理；模型組：細胞于培養(yǎng)基中加入600μmol/L的CoCl2處理24 h；低劑量Sch B保護組：細胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為1μmol/L的Sch B預處理2h后，其余操作同模型組；高劑量Sch B

2、保護組：細胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為10μmol/L的Sch B預處理2h后，其余操作同模型組；低劑量Sch B組：細胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為1μmol/L的Sch B處理2h；高劑量Sch B組：細胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為10μmol/L的Sch B處理2h。CCK-8試劑盒檢測各組細胞活性；AnnexinV-FITC/PI雙標記流式細胞儀檢測各組細胞凋亡率；Western Blot檢測各組細胞缺氧誘導因子1，α亞基（HIF-1α）、P

3、53蛋白的表達；RT-PCR檢測各組HIF-1α和誘導型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表達。
　　結果：與對照組相比，模型組細胞活性顯著降低，細胞凋亡率顯著增加，HIF-1α蛋白表達量顯著增加，P53蛋白表達量顯著減少，HIF-1αmRNA表達量差異無統(tǒng)計學意義，iNOS mRNA表達量顯著增加；與模型組相比，低劑量和高劑量Sch B保護組細胞活性均顯著增加，細胞凋亡率均顯著降低，HIF-1α蛋白表達量均顯著減少，P53蛋白表

4、達量均顯著增加，HIF-1αmRNA和iNOS mRNA表達量均顯著減少，且高劑量Sch B保護組均較低劑量Sch B保護組作用更顯著；與對照組相比，低劑量和高劑量Sch B組細胞活性、細胞凋亡率、P53蛋白表達量、iNOS mRNA表達量均差異無統(tǒng)計學意義，且低劑量和高劑量Sch B組幾乎不表達HIF-1α蛋白。
　　結論：1μmol/L和10μmol/L的Sch B可通過抑制HIF-1α和iNOS的表達減少HK-2細胞的凋亡，