基于毒性篩選的中藥甘遂化學(xué)成分研究.pdf

1、甘遂為大戟科（Euphorbiaceae）大戟屬植物甘遂（Euphorbia kansuiT.N.Liou exT.P.Wang）的干燥塊根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，有2000多年的藥用歷史，是一味傳統(tǒng)的峻下逐水藥?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，其具有抗腫瘤、抗病毒、抗生育和免疫抑制等作用，有著重要的臨床藥用價(jià)值和開(kāi)發(fā)前景。但由于甘遂具有致瀉、致炎和黏膜刺激等毒副作用，極大地限制了甘遂的臨床應(yīng)用。
　　甘遂中各成分種類繁多，到目前為止已經(jīng)分離鑒

2、定出的非揮發(fā)性的特征性化合物約有100余種，經(jīng)總結(jié)整理成化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)，包括二萜類成分63個(gè)、三萜類成分15個(gè)、甾醇類成分14個(gè)、黃酮類成分3個(gè)和酚類衍生物2個(gè)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，二萜類成分為其主要的毒效成分，但相關(guān)研究主要集中在藥理毒理學(xué)研究和炮制減毒工藝研究上，對(duì)于具體的毒性成分研究甚少。
　　本文基于毒性篩選，結(jié)合新型的樣品預(yù)處理技術(shù)與液相色譜-多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用分析方法，對(duì)甘遂的二萜類化學(xué)成分及體內(nèi)入血成分進(jìn)行了研究。首先，采用單因素

3、考察試驗(yàn)結(jié)合響應(yīng)面分析法，建立了提取甘遂的加速溶劑萃取法，采用HPLC-PDA-ESI-ITMSn對(duì)甘遂提取液進(jìn)行鑒析，共鑒定出52個(gè)二萜類成分。然后，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇對(duì)甘遂提取物進(jìn)行萃取，取萃取物進(jìn)行小鼠毒性試驗(yàn)，篩選出毒性最大部位為石油醚部位，并利用HPLC-PDA-ESI-ITMSn/TOF-MS對(duì)石油醚部位的化學(xué)成分進(jìn)行分析；接著，對(duì)SD大鼠灌胃給予石油醚部位萃取物，利用HPLC-PDA-ESI-ITMS

4、n對(duì)給藥血漿進(jìn)行分析，鑒別出6個(gè)入血成分，分別為：Kansuinine G、Kansuinine M、Kansuinine D、3β,5α,7β,15β-Tetraacetoxy-9α- Nicotinoyloxyjatropha-6(17)-11E-dien-14-one、Kansuinine E、Kansuinine L。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)了一些未知的代謝產(chǎn)物，為深入研究甘遂的毒效性物質(zhì)基礎(chǔ)提供了科學(xué)依據(jù)。
　　本課題首次將加速溶劑萃