YAP在細(xì)胞衰老中的作用機(jī)制研究.pdf

1、細(xì)胞衰老是指細(xì)胞喪失增殖能力后進(jìn)入的一種相對穩(wěn)定的狀態(tài)，端粒的縮短、化療藥處理引起的DNA損傷、癌基因的異?；罨榷寄苷T導(dǎo)細(xì)胞衰老的發(fā)生。細(xì)胞衰老能夠顯著抑制細(xì)胞的生長，因此被認(rèn)為是抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素之一。然而，越來越多的報道顯示衰老細(xì)胞還具有促進(jìn)腫瘤的作用。更具體地說，衰老的細(xì)胞在體內(nèi)積累會誘發(fā)腫瘤，在化療后的實體瘤中積累則有可能促進(jìn)其周圍細(xì)胞的增殖，以及通過SASP（senescence-associated sectroy

2、 phenotype）促進(jìn)癌細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生。因此，及時清除化療后積累的衰老細(xì)胞或許有利于增強(qiáng)化療的療效。
　　衰老的細(xì)胞可以通過向外分泌細(xì)胞因子，招募先天免疫細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等將其清除，但是老年個體以及接受化療的患者免疫系統(tǒng)都不完善，無法通過免疫系統(tǒng)達(dá)到清除的目的。此外，大多數(shù)細(xì)胞衰老后都非常穩(wěn)定，這是由于它們具備抵抗凋亡的能力。因此，我們可以靶向衰老細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制，從而誘導(dǎo)衰老細(xì)胞進(jìn)入凋亡程序而被清除

3、。
　　為探究衰老細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制，本研究建立了低濃度阿霉素(doxorubicin，DOX)誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老模型。我們以衰老細(xì)胞的扁平增大表型為出發(fā)點，發(fā)現(xiàn)Hippo通路上的關(guān)鍵效應(yīng)因子YAP在阿霉素誘導(dǎo)的衰老細(xì)胞中有明顯的核累積現(xiàn)象，這很可能是由于衰老細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的接觸面積增大而誘發(fā)的。YAP是促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展的癌基因，在許多腫瘤中都異?；罨１M管異常表達(dá)的癌基因會促進(jìn)細(xì)胞衰老的發(fā)生，但是在本研究中高表達(dá)YAP或活化型突變Y

4、ApS127A都不能誘導(dǎo)細(xì)胞衰老的發(fā)生;敲降YAP后同樣如此，反而促進(jìn)了更多的細(xì)胞凋亡。因此，我們認(rèn)為在阿霉素誘導(dǎo)的衰老細(xì)胞中，YAP的活化是衰老的結(jié)果，可以被癌細(xì)胞利用來抵抗凋亡。
　　核內(nèi)積累的YAP具有較高的轉(zhuǎn)錄活性，能夠促進(jìn)下游一系列靶基因的表達(dá)，如ANKRD1、CTGF以及CYR61等?？沟蛲龅鞍譻urvivin也是YAP的下游靶基因之一。Survivin作為細(xì)胞凋亡蛋白抑制因子家族的成員，在抵抗細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮著重要

5、作用。本研究發(fā)現(xiàn)，在阿霉素誘導(dǎo)的衰老細(xì)胞中，YAP的活化促進(jìn)了survivin的表達(dá);經(jīng)低濃度阿霉素誘導(dǎo)進(jìn)入衰老狀態(tài)的細(xì)胞，在加入靶向YAP的抑制劑verteporfin或者survivin的抑制劑YM155后，能夠啟動凋亡。
　　綜上，本研究表明，低濃度阿霉素誘導(dǎo)的衰老細(xì)胞依賴YAP的核內(nèi)積累及活化來促進(jìn)survivin的表達(dá)，從而抵抗細(xì)胞凋亡而維持其存活狀態(tài);低濃度的阿霉素可與YAP或survivin的抑制劑聯(lián)用，以清除衰老細(xì)