擬南芥四個雄配子體和一個雄性不育突變體的分離和分子遺傳研究.pdf

1、雄配子體在被子植物有性生殖過程中起著重要作用，然而目前已知的參與調(diào)節(jié)雄配子體發(fā)育和功能的基因還很少。本文通過統(tǒng)計擬南芥幼苗卡那霉素(選擇性標(biāo)記)抗性與敏感性分離比，從Ds插入突變體庫中篩選到四個偏離孟德爾分離比的突變體：KD360、KD361、KD362、KD375。正反交實(shí)驗表明KD360、KD362和KD375僅影響雄配子體的傳遞，而KD361既影響雄配子體傳遞又影響雌配子體傳遞；KD362完全不能通過雄配子體傳遞，而KD360、K

2、D361和KD375僅部分不能通過雄配子體傳遞。形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)研究表明KD360、KD361和KD375雄配子體敗育發(fā)生在單核時期，而KD362雄配子體敗育發(fā)生在兩核之后三核之前。基因克隆顯示KD360 Ds插入到Atlg44224唯一的外顯子內(nèi)，預(yù)測Atlg44224編碼ECAl配子體發(fā)生相關(guān)蛋白。KD361 Ds插入到At4g00380 ATG上游1bp處。預(yù)測At4g00380編碼含XH/XS元件或XS鋅指元件蛋白。KD362有兩

3、個Ds插入，一個插入到At2g01560第一個外顯子內(nèi)，另一個插入到At2g01910和At2g01913之間，距At2g01910終止密碼子TGA下游460bp，距At2g01913終止密碼子TTA下游1284bp。KD375 Ds插入到Atlg26815 ATG上游134bp處。預(yù)測Atlg26815編碼的蛋白含有一個F-box結(jié)合區(qū)域和一個跨膜元件。通過Ds插入位點(diǎn)純雜合鑒定以及等位突變體分析我們推測：Atlg44224和At4g

4、00380突變可能是KD360和KD361雄配子體部分致死的原因，即Atlg44224和At4g00380可能參與調(diào)控擬南芥雄配子體發(fā)育；KD362雄配子致死表型可能是Ds插入導(dǎo)致At2g01913突變造成；KD375雄配子體部分致死表型與Atlg26815上游的Ds插入緊密連鎖。Pro∷GUS轉(zhuǎn)基因植株Gus染色結(jié)果表明：Atlg44224在小孢子、成熟花粉粒、萌發(fā)的花粉粒、柱頭、以及早期胚胎中表達(dá)；At4g00380在四分體、小孢子