一個(gè)擬南芥晚花突變體的定位與分析.pdf

1、開花是植物由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)換的一個(gè)重要轉(zhuǎn)折點(diǎn)。在模式植物擬南芥中，開花啟動(dòng)至少受光周期途徑、春化途徑、自主途徑和赤霉素途徑等四條途徑的調(diào)控。這個(gè)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性有必要分離更多的開花時(shí)間突變體以更好的理解開花調(diào)控的遺傳和分子基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)室以Columbia型擬南芥為材料，通過EMS誘變篩選到一個(gè)晚花突變體，命名為flowering locus r（flr）。本研究對(duì)此突變體的遺傳背景進(jìn)行了純化，構(gòu)建了作圖定位群體，對(duì)突變基因進(jìn)行了定

2、位。
　　為了純化突變體的遺傳背景，我們以野生型(Columbia ecotype)為母本，突變體(Columbia ecotype)為父本進(jìn)行雜交，這樣發(fā)生在葉綠體和線粒體基因組中的突變就會(huì)去除。種植雜交一代(F1)，F(xiàn)1自交產(chǎn)生子二代(F2)，從F2中選擇晚花表型的突變體，純化突變體的遺傳背景，以減少額外突變對(duì)后續(xù)工作的影響。
　　為了構(gòu)建作圖群體，將突變體flr與不同遺傳背景的Ler生態(tài)型雜交，收獲子一代(F1)種子，

3、F1自交產(chǎn)生子二代(F2)，從F2中選擇具有晚花表型的突變體作為定位群體。提取群體中每一晚花突變體的基因組DNA，進(jìn)行基因型分析。利用已知的和自己創(chuàng)制的SSLP分子標(biāo)記對(duì)群體進(jìn)行了基因型分析。通過連鎖關(guān)系分析，該基因位于分子標(biāo)記NGA106和T20D1-6801之間。
　　本實(shí)驗(yàn)室前期的研究表明，此突變體的FLC表達(dá)量增加。在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中，除了自主途徑基因突變解除對(duì)FLC表達(dá)的抑制以外，有功能的FRI也能促進(jìn)FLC的表達(dá)。