聯(lián)合應(yīng)用BMP-2及細(xì)胞分化抑制因子1基因延緩?fù)醚甸g盤(pán)退變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　研究兔腰椎間盤(pán)髓核內(nèi)注射慢病毒攜帶的BMP-2和細(xì)胞分化抑制因子1（inhibitor of differentiation1，Id1）基因能否有效改善椎間盤(pán)退變進(jìn)程。
　　方法：
　?、沤?jīng)腹建立兔腰椎間盤(pán)細(xì)針穿刺退變模型，并在影像學(xué)和組織學(xué)上加以驗(yàn)證；⑵取3月齡新西蘭兔32只，體質(zhì)量2.0～2.5 kg；以L3/4、L4/5、L5/6為目標(biāo)椎間盤(pán)，經(jīng)腹細(xì)針穿刺法制造椎間盤(pán)退變模型。將30只造模成功的實(shí)驗(yàn)動(dòng)

2、物隨機(jī)分為5組，每組6只；造模后4周于各組目標(biāo)椎間盤(pán)中分別注射 Lv-BMP-2病毒（A組）、Lv-BMP-2+Lv-Id1病毒（B組）、Lv-Id1病毒（C組）、Lv-綠色熒光蛋白空載體病毒（D組）及PBS（E組）。于注射后2、4、8周各組分別隨機(jī)取2只動(dòng)物行 T2-mapping MRI檢查獲得確切的 T2弛豫時(shí)間（T2值）；之后處死動(dòng)物取椎間盤(pán)組織，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、ELISA法檢測(cè)Ⅱ型膠原及蛋白聚糖的 mRNA相對(duì)表達(dá)量及

3、含量。
　　結(jié)果：
　　①手術(shù)操作本身對(duì)兔子的體質(zhì)量無(wú)明顯影響，僅一只兔子發(fā)現(xiàn)腹壁與腸管輕度部分粘連；術(shù)后證實(shí)出穿刺的椎間盤(pán)為目標(biāo)椎間盤(pán)，其椎間盤(pán)高度指數(shù)和MRI信號(hào)強(qiáng)度呈進(jìn)行性退變改變；穿刺后4周組織學(xué)表現(xiàn)為髓核區(qū)域脊索細(xì)胞顯著減少而纖維細(xì)胞增生，纖維環(huán)結(jié)構(gòu)紊亂。②T2-mapping MRI檢查示，注射后0、2周各組間 T2值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；注射后4周，A、B組 T2值顯著高于 C、D、E組（P＜

4、0.05），A、B組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；注射后8周，B組 T2值顯著高于其余各組（P＜0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR及 ELISA檢測(cè)示，注射后2、4、8周 B組Ⅱ型膠原及蛋白聚糖的 mRNA相對(duì)表達(dá)量及含量均顯著高于其余各組（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　?、沤?jīng)腹纖維環(huán)細(xì)針穿刺法，操作簡(jiǎn)單，目標(biāo)椎間盤(pán)定位準(zhǔn)確，手術(shù)視野更佳，椎間盤(pán)退變程度一致，并發(fā)癥少；而且在影像學(xué)和組織學(xué)上符合人腰椎間盤(pán)退變情況；