單寧酸對布氏田鼠下丘腦弓狀核食欲調(diào)控基因表達和血清瘦素水平的影響.pdf

1、植物次生代謝物是植物對植食性動物進行化學(xué)防御的產(chǎn)物。具有苦澀味的單寧酸是一種重要的次生代謝物，影響植食性動物的取食行為。下丘腦弓狀核神經(jīng)元分泌的神經(jīng)肽Y(neuropeptide Y NPY)和刺鼠相關(guān)蛋白(agouti-related protein，AgRP)可以增強動物食欲，而阿片-促黑素細胞皮質(zhì)素原(pro-opiomelanocortin，POMC)抑制動物食欲，它們均受味覺系統(tǒng)的調(diào)控。血清中的瘦素與下丘腦弓狀核神經(jīng)元上的瘦素

2、受體(OB-Rb)相互作用，可調(diào)節(jié)NPY、AgRP及POMC等食欲調(diào)控基因的表達。布氏田鼠是我國內(nèi)蒙古草原的主要植食性動物，其所取食的植物含大量次生化合物。本研究以室內(nèi)繁殖的布氏田鼠為研究對象，用不同劑量（0％、3％及6％，分別為對照組、低劑量組和高劑量組）的單寧酸分四個時間(1d、5d、10d以及20d)連續(xù)處理布氏田鼠，用反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR法(reversetranscription quantitative real-tim

3、e PCR，RT-qPCR)測定下丘腦弓狀核食欲調(diào)控基因的mRNA表達量變化，用免疫組化法(Immunohistochemistry，IHC)測定下丘腦弓狀核食欲調(diào)控蛋白的表達量變化，用ELISA法測定血清中瘦素水平的變化，以探討單寧酸對布氏田鼠攝食中樞的影響，闡明單寧酸影響動物取食行為的神經(jīng)機制，為動植物協(xié)同進化提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　1、處理1d后，只有高劑量的單寧酸可以抑制雌雄布氏田鼠弓狀核NPY和AgRP mRN

4、A的表達，促進POMC mRNA的表達;處理5d和10d后，高低劑量的單寧酸溶液均抑制雌雄布氏田鼠NPY和AgRP mRNA的表達，促進POMC mRNA的表達;處理20d后，高低劑量的單寧酸仍然抑制雌性動物NPY和AgRP mRNA的表達，促進POMC mRNA的表達。而對雄性動物而言，只有低劑量的單寧酸溶液僅促進NPYmRNA的表達。但各劑量的單寧酸對于雌雄布氏田鼠下丘腦弓狀核OB-Rb mRNA的表達均無顯著影響。
　　2、

5、免疫組化結(jié)果表明，處理1d后，僅高劑量的單寧酸使雌雄布氏田鼠下丘腦弓狀核POMC的含量增加;處理5d后，高低劑量的單寧酸溶液均抑制雌雄動物NPY的表達，抑制雄性動物AgRP的表達，增加雌性動物POMC的含量。而只有高劑量單寧酸抑制雌性動物AgRP的表達，增加雄性動物POMC的含量;處理10d后，高低劑量的單寧酸均可抑制雌雄田鼠NPY和AgRP的表達，促進POMC的表達;處理20d后，高低劑量的單寧酸仍然抑制雌性田鼠NPY和AgRP的表達

6、，促進POMC的表達;但對雄性田鼠沒有顯著影響。同樣，各劑量單寧酸對于雌雄布氏田鼠下丘腦弓狀核OB-Rb的表達無顯著影響。
　　3、給雌雄布氏田鼠的口腔舌表面滴灌不同劑量的單寧酸溶液后，在四個處理時間段，對照組、低劑量組和高劑量組的體重之間沒有顯著差異，表明單寧酸對布氏田鼠的體重?zé)o顯著影響;
　　4、給雌雄布氏田鼠的口腔舌表面滴灌不同劑量的單寧酸溶液后，在不同的處理時間段，對照組、低劑量組和高劑量組的血清瘦素水平之間沒有顯著