一種定量分析雙歧桿菌的新方法.pdf

1、作為人和溫血?jiǎng)游矬w內(nèi)最重要的益生菌，雙歧桿菌對(duì)宿主顯示了多方面的促進(jìn)健康作用。目前市場(chǎng)上以含有雙歧桿菌的混合菌產(chǎn)品居多，而目前對(duì)該類產(chǎn)品卻沒(méi)有一個(gè)準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。 本文旨在建立一種新的雙歧桿菌定量分析技術(shù)。論文首先建立了雙歧桿菌的培養(yǎng)體系，兩歧雙歧桿菌的培養(yǎng)結(jié)果顯示：BBL瓊脂培養(yǎng)基和TPY液體培養(yǎng)基對(duì)兩歧雙歧桿菌的培養(yǎng)效果較好，作為兩歧雙歧桿菌的培養(yǎng)基。然后進(jìn)行了雙歧桿菌屬特征性酶F6PPK測(cè)定條件的優(yōu)化。試驗(yàn)首先改良了原初文

2、獻(xiàn)(Scardovi法)F6PPK酶活測(cè)定中對(duì)照反應(yīng)管的設(shè)置，又對(duì)雙歧桿菌培養(yǎng)時(shí)間、細(xì)胞破碎方法、底物濃度、比色波長(zhǎng)、反應(yīng)溫度與時(shí)間等條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，雙歧桿菌培養(yǎng)18h，收集茵體，以超聲波法破碎細(xì)胞制備粗酶液，采用4％的底物濃度，將粗酶液與底物于40℃保溫30min，最終反應(yīng)物于500nm比色，所得F6PPK酶活測(cè)定結(jié)果更可靠。 在獲得優(yōu)化的F6PPK酶活力測(cè)定條件的基礎(chǔ)上，通過(guò)培養(yǎng)不同的時(shí)間來(lái)獲取不同數(shù)量的菌體，用厭