探討灼燒技術(shù)在治療慢性扁桃體炎中對(duì)β-防御素-3表達(dá)的影響.pdf

1、目的：在灼燒技術(shù)（原灼烙技術(shù)，經(jīng)國家名稱規(guī)范后稱灼燒技術(shù)）治療慢性扁桃體炎前后進(jìn)行扁桃體組織取材，檢測(cè)人β-防御素-3（HBD-3、hBD-3）在扁桃體組織中的表達(dá)，探討灼燒技術(shù)在治療慢性扁桃體炎中對(duì)hBD-3表達(dá)的影響，為闡明灼燒技術(shù)的治療原理、指導(dǎo)臨床工作提供理論依據(jù)。
　　方法：⑴試驗(yàn)分組:選擇慢性扁桃體炎病人15位，健康志愿者15位;在灼燒前，選取15位慢性扁桃體炎病人的扁桃體組織標(biāo)本15例做為本次試驗(yàn)的A組（以下簡(jiǎn)稱灼燒

2、治療前組）;本次試驗(yàn)的15位慢性扁桃體炎患者，經(jīng)灼燒治療治愈后，觀察6月無復(fù)發(fā)，再次鉗取扁桃體組織標(biāo)本15例做為本次試驗(yàn)的B組（以下簡(jiǎn)稱灼燒治愈組）;健康志愿者15位，選其扁桃體組織標(biāo)本15例納入本次試驗(yàn)的C組（以下簡(jiǎn)稱健康志愿組）。⑵A、B、C組，進(jìn)行石蠟包埋組織并切片制作病理標(biāo)本，從形態(tài)學(xué)觀察及免疫組織化學(xué)檢測(cè)hBD-3。⑶分別提取A、B、C組扁桃體組織總RNA，用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)標(biāo)本中hBD-3轉(zhuǎn)錄水平的表

3、達(dá)。⑷A、B、C組，提取扁桃體組織用Western blotting檢測(cè)hBD-3在蛋白水平的表達(dá)。
　　結(jié)果：①蘇木精-伊紅染色結(jié)果顯示:A組是慢性扁桃體炎組織，B組、C組為正常扁桃體組織，無慢性炎癥。②免疫組化半定量積分分析hBD3表達(dá)結(jié)果，A組15個(gè)標(biāo)本中有強(qiáng)陽性、陽性、弱陽性的例數(shù)分別為12、2、1;B組15例有14例陰性、1例弱陽性;C組15例中有14例陰性、1例弱陽性。選擇秩和檢驗(yàn)，灼燒治療前組的hBD3在免疫組化中的

4、表達(dá)量明顯高于健康志愿者組，且差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。灼燒治療前組hBD3在免疫組化中的表達(dá)量明顯高于灼燒技術(shù)治愈組，且差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③RT-PCR結(jié)果顯示A組觀察到約182bp的片段，在約為182bp處有明亮的單一條帶顯示，與設(shè)計(jì)的hBD3片段長度一致。B組、C組均在約為182bp處有較灰暗的單一條帶顯示。選擇t檢驗(yàn)，灼燒治療前組hBD3基因的表達(dá)量明顯高于健康志愿者組，且差異顯著，具有統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。灼燒治療前組hBD3基因的表達(dá)量明顯高于灼燒技術(shù)治愈組，且差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。④westernblotting的檢測(cè)結(jié)果顯示A組可見分子量約5KD較深的條帶，與預(yù)期的hBD3蛋白分子量大小相同。而B組、C組分子量約5KD較淺的條帶。選擇t檢驗(yàn)，灼燒治療前組hBD3蛋白的表達(dá)量明顯高于健康志愿者組，且差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。灼燒治療前組hBD3蛋白的表達(dá)量明顯高于灼燒技術(shù)治