化濁消癥軟肝方對H22肝癌小鼠CyclinD1和p16表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過觀察化濁消癥軟肝方對H22肝癌小鼠移植瘤的抑制作用及調(diào)控蛋白CyclinD1、p16表達(dá)的影響，初步探索化濁消癥軟肝方對免疫器官的保護(hù)作用和防治肝癌的機(jī)制。
　　方法：建立昆明小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為四組：模型組、化濁消癥軟肝方(中藥)組、5-氟尿嘧啶(西藥)組、化濁消癥軟肝方與5-氟尿嘧啶(聯(lián)合)組，每組10只。給藥10天期間，模型組灌胃雙蒸水和腹腔注射生理鹽水，中藥組灌胃化濁消癥軟肝方配方顆粒水溶液和腹

2、腔注射生理鹽水，西藥組灌胃雙蒸水和腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU)，聯(lián)合組灌胃化濁消癥軟肝方配方顆粒水溶液和腹腔注射5-FU。以上各組用藥為化濁消癥軟肝方配方顆粒水溶液0.2ml(約含生藥0.43g)，5-Fu20mg/kg/d。完整剝?nèi)∧[瘤組織、胸腺及脾臟。觀察指標(biāo)(1)一般情況；(2)抑瘤率、q值及器官指數(shù)；(3)腫瘤組織形態(tài)學(xué)變化；(4)瘤體CyclinD1、p16 Pr的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況：動物造模

3、后，用藥期間無死亡。精神狀態(tài)、覓食活動、行動靈敏性等一般情況觀察，中藥組與聯(lián)合組優(yōu)于西藥組和模型組；
　　2.對H22肝癌細(xì)胞的抑制作用：頸椎脫臼處死小鼠，完整剝離腫瘤組織，計(jì)算抑瘤率。中藥組的抑瘤率為33.6％，西藥組為40.6%，聯(lián)合組為54.3%，都達(dá)了療效標(biāo)準(zhǔn)，說明用藥組均具有治療作用；聯(lián)合組與中藥組相比抑瘤率升高了38.1%，聯(lián)合組與西藥組相比升高了25.2%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組；
　

4、　3.頸椎脫臼處死小鼠，完整剝離胸腺組織、脾組織，稱重后，計(jì)算胸腺指數(shù)、脾指數(shù)，小鼠體質(zhì)量按處死前稱取量來計(jì)算。中藥組與模型組相比，脾指數(shù)與胸腺指數(shù)均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中藥組與西藥組相比，肝癌小鼠的免疫器官指數(shù)均有顯著性提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中藥組與聯(lián)合組比較，免疫器官指數(shù)均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而聯(lián)合組與西藥組相比，胸腺指數(shù)升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合組與西藥組相比，脾指數(shù)升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明中藥能提高免疫功能，

5、對免疫器官有保護(hù)作用，5-Fu對小鼠的免疫器官有抑制作用；
　　4.腫瘤組織病理學(xué)形態(tài)顯示：在模型組中，腫瘤細(xì)胞生長方式為彌散或團(tuán)塊狀，細(xì)胞緊密排列，核大漿少，具有明顯的核異型性；在中藥組中，比模型組壞死的癌細(xì)胞細(xì)胞大小各異且數(shù)目多；在西藥組中，細(xì)胞排列疏松，出現(xiàn)大量的壞死細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)目減少；在聯(lián)合組中，結(jié)締組織明顯，細(xì)胞稀疏程度增加，壞死癌細(xì)胞數(shù)目增加；
　　5.免疫組化顯示：CyclinD1在模型組中可見陽性表達(dá)最多，在

6、中藥組與西藥物組呈陽性表達(dá)，在聯(lián)合組呈弱陽性表達(dá)。CyclinD1的表達(dá)水平：與模型組相比，中藥組降低了26.7%，西藥組降低了44.5%，聯(lián)合組降低了52.5%，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明用藥組治療均有效；與中藥組相比，聯(lián)合組降低了35.2%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與西藥組相比，聯(lián)合組降低了14.4%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組。p16在模型組中呈陰性表達(dá)，在中藥組和西藥組呈弱陽性表達(dá)，在聯(lián)合組呈陽性表達(dá)。p16的表

7、達(dá)水平：與模型組相比，中藥組升高了14.2%，西藥組升高了29.7%，聯(lián)合組升高了48.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明用藥組治療均有效；與中藥組相比，聯(lián)合組升高了29.9%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與西藥組相比，聯(lián)合組升高了14.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組。
　　結(jié)論：
　　1.化濁消癥軟肝方具有抑制H22肝癌移植瘤增殖的作用，其機(jī)制可能與下調(diào)腫瘤組織的CyclinD1表達(dá)，上調(diào)p16的表達(dá)有關(guān)。