粘質(zhì)沙雷氏菌PS-1菌株對(duì)甜菜夜蛾幼蟲殺蟲機(jī)理的初步研究.pdf

1、學(xué)校代碼：10564學(xué)號(hào)：2013202231分類號(hào)：Q965.8密級(jí)：碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文粘質(zhì)沙雷氏菌PS1菌株對(duì)甜菜夜蛾幼蟲殺蟲機(jī)理的初步研究趙曉峰指導(dǎo)教師：指導(dǎo)教師：張茂新教授學(xué)院名稱：學(xué)院名稱：農(nóng)學(xué)院專業(yè)名稱：專業(yè)名稱：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治答辯委員會(huì)主席：答辯委員會(huì)主席：吳偉堅(jiān)教授中國(guó)廣州2016年6月I摘要甜菜夜蛾SpodopteraexiguaHbner，屬于鱗翅目、夜蛾科、灰翅夜蛾屬，是一種世界性分布的多食性農(nóng)業(yè)害蟲，主

2、要為害蔬菜。該蟲抗藥性強(qiáng)，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對(duì)多種殺蟲劑（如有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類、昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類等）和Bt制劑產(chǎn)生了抗性。因此，找到一種新型生物藥劑防治甜菜夜蛾成為迫切需要。粘質(zhì)沙雷氏菌SerratiamarcescensPS1菌株（以下簡(jiǎn)稱PS1菌株）是從罹病黃曲條跳甲幼蟲體內(nèi)分離獲得的一種新的病原菌，它對(duì)甜菜夜蛾幼蟲的生長(zhǎng)發(fā)育和存活有顯著的抑制作用，且菌體培養(yǎng)物的上清液對(duì)甜菜夜蛾也有很強(qiáng)的殺蟲活性。為了明確PS1菌株的殺

3、蟲機(jī)理，本文進(jìn)行了PS1菌株的生理生化試驗(yàn)，觀察了甜菜夜蛾幼蟲感染PS1后的病癥，并采用組織切片和透射電鏡的方法研究了甜菜夜蛾幼蟲感染后的中腸組織病理變化，分離培養(yǎng)了甜菜夜蛾幼蟲腸道共生細(xì)菌，并測(cè)定了PS1菌株對(duì)甜菜夜蛾腸道共生細(xì)菌的影響以及消化酶活性的影響，旨在進(jìn)一步闡明PS1菌株的殺蟲機(jī)理，為甜菜夜蛾的生物防治提供新方法，為PS1菌株的研發(fā)和田間應(yīng)用提供依據(jù)?，F(xiàn)將主要結(jié)果摘要如下：1.PS1菌株的生理生化特性PS1菌株在恒溫28℃，

4、轉(zhuǎn)速為160rmin，LB液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較為迅速，約4h后進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，20~32h為穩(wěn)定期并達(dá)到生長(zhǎng)最大值，32h之后菌體進(jìn)入衰亡期。生理生化試驗(yàn)表明：PS1為革蘭氏陰性菌，能夠利用葡萄糖、甘露醇，肌醇，不能利用山梨糖醇、鼠李糖和阿拉伯糖，且利用效果為甘露醇葡萄糖肌醇。PS1菌株不產(chǎn)生溶血，M.R.試驗(yàn)為陰性，H2O2試驗(yàn)產(chǎn)氣，解脂活性試驗(yàn)表現(xiàn)陽(yáng)性，吲哚試驗(yàn)呈陽(yáng)性，抗生素藥敏試驗(yàn)表明PS1菌株對(duì)氯霉素、壯觀霉素和四環(huán)素敏感，抑菌圈

5、直徑由大到小順序?yàn)閴延^霉素氯霉素四環(huán)素，PS1菌株對(duì)氨芐青霉素不敏感。2.PS1菌株破壞甜菜夜蛾幼蟲腸道細(xì)胞和細(xì)胞器結(jié)構(gòu)運(yùn)用切片技術(shù)和顯微技術(shù)觀察了PS1菌株對(duì)甜菜夜蛾幼蟲中腸腸道細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明：PS1菌株能夠破壞甜菜夜蛾幼蟲中腸腸壁細(xì)胞，使腸壁細(xì)胞變形甚至脫落到腸腔，且隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，破壞作用增強(qiáng)。用透射電鏡法觀察了PS1作用后對(duì)甜菜夜蛾幼蟲腸道細(xì)胞器的影響。結(jié)果表明：被感染蟲體細(xì)胞微絨毛排列無(wú)規(guī)則，有的甚至脫落，線粒體