上?；B(niǎo)市場(chǎng)鳥(niǎo)類(lèi)吸蟲(chóng)的種類(lèi)鑒定.pdf

1、吸蟲(chóng)是鳥(niǎo)類(lèi)的常見(jiàn)寄生蟲(chóng)，吸蟲(chóng)的感染不僅影響鳥(niǎo)類(lèi)的生長(zhǎng)發(fā)育，嚴(yán)重者可造成死亡。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)鳥(niǎo)類(lèi)的吸蟲(chóng)現(xiàn)有578種，其中有些吸蟲(chóng)，如卷棘口吸蟲(chóng)、日本棘隙吸蟲(chóng)、日本杯尾吸蟲(chóng)和涉禽嗜眼吸蟲(chóng)等可感染人，對(duì)人類(lèi)的健康有一定危害。隨著人類(lèi)生活水平的提高，人與鳥(niǎo)類(lèi)的接觸越來(lái)越頻繁，人類(lèi)感染吸蟲(chóng)的機(jī)會(huì)大大增高。因此，加強(qiáng)對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)吸蟲(chóng)的研究，不僅有利于鳥(niǎo)類(lèi)寄生蟲(chóng)病的防控，而且有利于提高人們防范人獸共患寄生蟲(chóng)病的意識(shí)，具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。在前期研究中，本

2、課題組于2012～2013年從來(lái)自上?；B(niǎo)市場(chǎng)的144只鳥(niǎo)中檢獲280條吸蟲(chóng)，但未鑒定其種類(lèi)。本研究采用形態(tài)學(xué)或形態(tài)學(xué)結(jié)合分子生物學(xué)方法對(duì)檢獲的吸蟲(chóng)進(jìn)行種類(lèi)鑒定，為評(píng)估鳥(niǎo)類(lèi)寄生蟲(chóng)對(duì)人類(lèi)健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)、為鳥(niǎo)類(lèi)寄生蟲(chóng)病的防控提供依據(jù)。
　　1. DNA條形碼技術(shù)在鳥(niǎo)類(lèi)鑒定中的應(yīng)用
　　為進(jìn)一步確定購(gòu)自花鳥(niǎo)市場(chǎng)鳥(niǎo)類(lèi)的種類(lèi)，采用DNA條形碼技術(shù)，從來(lái)自上海花鳥(niǎo)市場(chǎng)和華東師范大學(xué)的14種144只鳥(niǎo)中，選取35只鳥(niǎo)的肌肉樣品，提取DNA

3、，對(duì)COⅠ基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，與各種鳥(niǎo)的COⅠ片段進(jìn)行BLAST比對(duì)，并通過(guò)距離法和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)檢驗(yàn)分析結(jié)果的可靠性。結(jié)果顯示，擴(kuò)增獲得的基因序列與相關(guān)鳥(niǎo)類(lèi)的COⅠ基因相似性達(dá)99％，其中2只白鹡鸰被誤判為灰背鶇，2只山斑鳩被誤判為家鴿。距離法分析顯示，種內(nèi)平均遺傳距離（0.2%）遠(yuǎn)小于種間平均遺傳距離（16.7%），但灰背鶇與烏灰鶇遺傳差異小。進(jìn)化樹(shù)分析顯示，除灰背鶇和烏灰鶇外，不同物種在發(fā)育樹(shù)上分支明顯，表明DNA條形碼能鑒定大部

4、分鳥(niǎo)，但對(duì)近緣物種的精確鑒定還有待提高。研究結(jié)果表明，所購(gòu)14種鳥(niǎo)中，有12種鳥(niǎo)與其名稱(chēng)相符，有2種為錯(cuò)定種。
　　2.棘口目吸蟲(chóng)的種類(lèi)鑒定
　　為確定來(lái)自喜鵲和山斑鳩體內(nèi)17條棘口吸蟲(chóng)的種類(lèi)，采用形態(tài)學(xué)結(jié)合分子生物學(xué)的方法進(jìn)行種類(lèi)鑒定。分子生物學(xué)結(jié)果顯示，來(lái)自喜鵲和山斑鳩蟲(chóng)體的線粒體NADH脫氫酶1（ND1）基因同源性為99%，其N(xiāo)D1序列在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)上歸為同一分支，與其親緣關(guān)系最近的是強(qiáng)壯棘口吸蟲(chóng)（Echinostoma

5、 robustum）和弗氏棘口吸蟲(chóng)（E. friedi）。形態(tài)學(xué)觀測(cè)結(jié)果顯示，來(lái)自同一種鳥(niǎo)的蟲(chóng)體具有相似的形態(tài)結(jié)構(gòu)，而兩種鳥(niǎo)之間的蟲(chóng)體形態(tài)存在一定差異；通過(guò)比較所獲得蟲(chóng)體與強(qiáng)壯棘口吸蟲(chóng)、弗氏棘口吸蟲(chóng)之間的形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)這兩種鳥(niǎo)體內(nèi)檢出的棘口吸蟲(chóng)與弗氏棘口吸蟲(chóng)的形態(tài)特征更為相符。結(jié)合分子生物學(xué)和形態(tài)學(xué)鑒定的結(jié)果，確定感染喜鵲和山斑鳩的棘口科吸蟲(chóng)為弗氏棘口吸蟲(chóng)，這是弗氏棘口吸蟲(chóng)在國(guó)內(nèi)的首次報(bào)道，喜鵲和山斑鳩應(yīng)為弗氏棘口吸蟲(chóng)的新宿主。

6、　　3.斜睪目、后睪目和梟形目吸蟲(chóng)的種類(lèi)鑒定
　　為進(jìn)一步確定來(lái)自上?；B(niǎo)市場(chǎng)鳥(niǎo)類(lèi)寄生吸蟲(chóng)的種類(lèi)，采用形態(tài)學(xué)方法對(duì)來(lái)自6種鳥(niǎo)的256條吸蟲(chóng)進(jìn)行種類(lèi)鑒定。制作部分吸蟲(chóng)封片標(biāo)本，觀測(cè)封片蟲(chóng)體的形態(tài)與結(jié)構(gòu)，查閱相關(guān)文獻(xiàn)，與國(guó)內(nèi)已報(bào)道的吸蟲(chóng)進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，檢獲的256條吸蟲(chóng)隸屬于3目（斜睪目、后睪目和梟形目）6科8屬，其中已鑒了2個(gè)種，分別為黑鶇窄體吸蟲(chóng)（Lyperosomum turdia）和草鹀滑口吸蟲(chóng)（Glaphyrostomu

7、m emberizae），其余吸蟲(chóng)鑒定到6個(gè)屬，分別為短腺屬吸蟲(chóng)（Brachylecithum sp.）、頓水屬吸蟲(chóng)（Tanaisia sp.）、斜睪屬吸蟲(chóng)（Plagiorchis sp.）、次睪屬吸蟲(chóng)（Metorchis sp.）、新雙穴屬吸蟲(chóng)（Neodiplostomum sp.）以及短咽屬吸蟲(chóng)（Brachylaima sp.）。灰背鶇為短腺屬吸蟲(chóng)的國(guó)內(nèi)宿主新紀(jì)錄，灰喜鵲為草鹀滑口吸蟲(chóng)的宿主新紀(jì)錄。
　　4.我國(guó)鳥(niǎo)類(lèi)棘口科吸蟲(chóng)

8、種類(lèi)與地理分布
　　為便于全面了解我國(guó)鳥(niǎo)類(lèi)棘口科吸蟲(chóng)的種類(lèi)與分布情況，收集整理了相關(guān)文獻(xiàn)，依照亞科、屬、種的字母順序，將在我國(guó)鳥(niǎo)類(lèi)發(fā)現(xiàn)的棘口科吸蟲(chóng)種類(lèi)、宿主和寄生部位、地理分布整理成文。共收錄棘口科吸蟲(chóng)9亞科22屬115種，其中腫頭亞科有1屬2種，棘隙亞科有7屬33種，棘口亞科有6屬51種，鞭帶亞科有2屬15種，低頸亞科有2屬3種，堅(jiān)體亞科有1屬5種，柄口亞科有1屬2種，沙穴亞科有1屬1種，伴突亞科有1屬3種，其中有10種可寄生于