基于三維細(xì)胞模型進(jìn)行吳茱萸生物堿抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的:1.設(shè)計(jì)合成10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿。2.基于二維細(xì)胞模型和三維細(xì)胞模型，研究吳茱萸堿、吳茱萸次堿、10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿等4種生物堿的抗腫瘤活性的異同，探討三維細(xì)胞模型在藥物篩選中的可行性。
　　方法:1.通過化學(xué)合成的方法合成10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿，然后利用元素分析、紅外光譜、核磁共振光譜及質(zhì)譜等分析手段對(duì)這兩種生物堿衍生物進(jìn)行

2、了結(jié)構(gòu)表征。2.基于二維細(xì)胞模型，采用MTT法檢測4種吳茱萸生物堿對(duì)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞，SMMC-7721人肝癌細(xì)胞，SW-1353入骨肉瘤細(xì)胞等3種腫瘤細(xì)胞的體外增殖抑制情況。計(jì)算其抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50)。3.采用hanging drop法構(gòu)建三維細(xì)胞球模型，用相差顯微鏡、SEM掃描電子顯微鏡、倒置顯微鏡及激光共聚焦成像技術(shù)等手段，對(duì)構(gòu)建的三維細(xì)胞球模型進(jìn)行形態(tài)學(xué)表征，選用Live/Dead Viability/Cyto

3、toxicity試劑盒對(duì)三維細(xì)胞模型進(jìn)行活力測試，基于構(gòu)建的三維細(xì)胞球模型進(jìn)行4種吳茱萸生物堿的抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)，最后采用Live/DeadViability/Cytotoxicity試劑盒測試了吳茱萸堿和吳茱萸次堿作用于三維細(xì)胞球模型48h后的細(xì)胞活力，計(jì)算了抑制率。
　　結(jié)果:1.本課題合成了所期望的目標(biāo)化合物。2.在二維培養(yǎng)體系中，吳茱萸堿、吳茱萸次堿、10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿等4種生物堿對(duì)3種腫

4、瘤細(xì)胞模型有明顯的抑制作用，且隨藥物濃度的增加，抑制率逐漸增大。3.在三維培養(yǎng)體系中，本課題構(gòu)建了MCF-7人乳腺癌細(xì)胞和SMMC-7721人肝癌細(xì)胞的三維細(xì)胞球模型，并研究了吳茱萸堿、吳茱萸次堿對(duì)這兩種腫瘤細(xì)胞球的抑制情況，結(jié)果表明，與二維模型相比較，在三維腫瘤細(xì)胞球模型中抑制率比較低，這是由于藥物難于滲透到腫瘤球內(nèi)部的緣故，但是四種化合物對(duì)三種腫瘤細(xì)胞球的抗增殖抑制情況均呈劑量依賴性關(guān)系，與二維模型中的結(jié)果一致。
　　結(jié)論:該