大劑量硫胺素對1型糖尿病大鼠腎臟的影響及作用機(jī)制.pdf

1、目的：觀察大劑量硫胺素(維生素B1)對STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病SD大鼠早期腎臟的保護(hù)作用及腎臟組織ET-1和TGF-β1的表達(dá)水平。本實(shí)驗(yàn)采用單次鏈脲佐菌素（STZ）腹腔注射的方法制備1型糖尿病（DM）大鼠模型，口服補(bǔ)充大劑量硫胺素，探討硫胺素對DM大鼠腎臟的保護(hù)作用及其作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用硫胺素防治糖尿病腎?。―N）提供更深入的理論依據(jù)。
　　方法：
　　(1)在屏障環(huán)境中，將清潔級健康雄性SD大鼠36只隨機(jī)分成3組：正常對

2、照組(NC組)，糖尿病對照組(DM組)，糖尿病硫胺素干預(yù)組(DT組)，每組12只。DM組和DT組大鼠空腹?fàn)顟B(tài)下一次性腹腔注射濃度為2％的STZ60mg/kg，NC組大鼠腹腔注射相對應(yīng)體積的檸檬酸緩沖液。
　　(2)分別在實(shí)驗(yàn)的第4、6、8、10周末用代謝籠收集各組大鼠24小時(shí)尿液標(biāo)本，記錄大鼠的體重、尿量及進(jìn)水量，然后從每組大鼠中各隨機(jī)抽取3只，2%的戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉后下腔靜脈采血，留取血液、腎臟、胰腺組織標(biāo)本；計(jì)

3、算腎重/體重比值(mg/g)。
　　(3)采用放免法檢測24hMAU；全自動(dòng)生化儀檢測血清CysC、尿β2-MG、24小時(shí)尿蛋白。
　　(4)HE染色觀察大鼠胰腺、腎臟組織的病理學(xué)結(jié)構(gòu)；免疫組化檢測腎臟ET-1和TGF-β1的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　(1)成模率：糖尿病大鼠成模率為95.83%，陰轉(zhuǎn)率和死亡率為0。
　　(2)體重、相對腎重比較：DM和DT組模型大鼠體重低于相同階段NC組大鼠體重，DM和

4、DT組模型大鼠腎重/體重比(KW/BW)明顯高于同階段NC組,腎臟代償性增生顯著。
　　(3)血液生化指標(biāo)比較：DM組和DT組與NC組血糖和血清CysC相比各階段均增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,血糖在DM組和DT組之間無差異，血清CysC DM組與DT組逐漸升高，在第6周和第8周時(shí)二者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　(4)尿液生化指標(biāo)比較：24hMAU和24小時(shí)尿蛋白：DM組和DT組與NC組相比各階段均增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,DM組與DT組逐

5、漸升高，隨著時(shí)間的推移，二者差異逐漸減小，在第4周和第6周時(shí)二者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，第8周和第10周無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；三組之間尿β2-MG無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　(5)HE染色比較：NC組大鼠腎臟、胰腺形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，界限清晰；DM和DT組胰腺組織遭到破壞，二者無明顯差異，腎臟結(jié)構(gòu)DT組損傷介于NC組和DM組之間。
　　(6)免疫組化比較：各階段大鼠腎小球和腎小管ET-1、TGF-β1的表達(dá)水平DM組最高, DT組其次，NC組最低。

6、　　結(jié)論：
　　(1)在清潔的屏障環(huán)境中雄性SD大鼠模型成模率高,陰轉(zhuǎn)率和死亡率低，模型穩(wěn)定，能夠模擬DN發(fā)病過程中的病理生理變化，是比較理想的DN模型。
　　(2)大劑量硫胺素對STZ誘導(dǎo)的T1DM大鼠腎臟有一定的保護(hù)作用。
　　(3)硫胺素作用機(jī)制可能為：延緩糖尿病大鼠早期24hMAU、尿蛋白的出現(xiàn)，降低血清CysC，延緩腎小球、腎小管的損害；降低腎臟組織中ET-1、TGF-β1細(xì)胞因子表達(dá)水平，保護(hù)T1DM大鼠的