T細(xì)胞中過(guò)表達(dá)Akt抵抗腫瘤免疫抑制和增強(qiáng)抗腫瘤活性小鼠CT26腫瘤模型中多周期氟尿嘧啶化療損傷細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗腫瘤功能.pdf

1、目的：
　　腫瘤在其形成中產(chǎn)生了獨(dú)特的微環(huán)境，具有異質(zhì)性，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，能分泌刺激性生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子，募集不同類型的細(xì)胞，通過(guò)多種機(jī)制抑制免疫應(yīng)答，逃避免疫監(jiān)視和免疫系統(tǒng)的攻擊。復(fù)雜的炎癥和免疫抑制環(huán)境會(huì)大大影響腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞活性，回輸?shù)腡細(xì)胞也會(huì)被腫瘤微環(huán)境所抑制，降低治療的有效性。針對(duì)某一種抑制策略的療法通常不能廣泛和長(zhǎng)期有效，我們通過(guò)增強(qiáng)回輸?shù)腡細(xì)胞活性，使之能夠抵抗腫瘤中已知和未知的免疫抑制因子，可能會(huì)是一種有效的方法。對(duì)

2、T細(xì)胞的信號(hào)通路進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)絲氨酸/蘇氨酸蛋白酶Akt（蛋白激酶B，PKB）在T細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)功能中處于信號(hào)中樞節(jié)點(diǎn)，通過(guò)調(diào)節(jié)Akt來(lái)提高T細(xì)胞抗腫瘤活性有顯著的研究意義。
　　方法：
　　我們?cè)诒磉_(dá)卵清蛋白(OVA)抗原的黑色素瘤(B16-OVA)模型中，檢測(cè)腫瘤微環(huán)境里T細(xì)胞的Akt磷酸化水平，然后通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)Akt至特異性靶向OVA的OT-1小鼠的T細(xì)胞中，檢測(cè)轉(zhuǎn)導(dǎo)Akt后OT-1細(xì)胞的體內(nèi)外抗腫瘤活性。在人前列

3、腺癌PC3M模型中，我們構(gòu)建了聯(lián)合表達(dá)靶向上皮細(xì)胞粘附分子(EpCAM)的嵌合抗原受體(CAR)和Akt的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，轉(zhuǎn)導(dǎo)至人外周血細(xì)胞，檢測(cè)過(guò)表達(dá)Akt的腫瘤特異性T細(xì)胞的體內(nèi)外抗腫瘤活性。
　　結(jié)果：
　　腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞的Akt磷酸化水平是受抑制的，OT-1過(guò)表達(dá)Akt后在B16-OVA細(xì)胞的刺激下分泌的IFN-γ增多且增殖能力增強(qiáng)?；剌斶^(guò)表達(dá)Akt的OT-1細(xì)胞治療B16-OVA腫瘤，其抑制腫瘤的生長(zhǎng)能力更強(qiáng)且

4、延長(zhǎng)了小鼠的生存期。PC3M細(xì)胞也表現(xiàn)多種免疫抑制表型，相比靶向P3CM表面抗原EpCAM的CAR-T細(xì)胞，過(guò)表達(dá)Akt的CAR-T細(xì)胞在PC3M微環(huán)境中增殖受到的抑制最少，凋亡水平降低，體外殺傷能力提高;回輸過(guò)表達(dá)Akt的CAR-T細(xì)胞治療免疫缺陷的NOD/SCID荷瘤小鼠時(shí)，對(duì)PC3M腫瘤生長(zhǎng)的抑制能力更強(qiáng)。
　　結(jié)論：
　　腫瘤特異性T細(xì)胞中過(guò)表達(dá)Akt能幫助其抵抗腫瘤微環(huán)境對(duì)T細(xì)胞活性的抑制，增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞的