大蒜含硫化合物藥動學(xué)及與H2S作用的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過研究大蒜含硫化合物，包括蒜氨酸(alliin)、大蒜辣素(allicin)、一硫二丙烯(DAS)、二硫二丙烯(DADS)、三硫二丙烯(DATS)在大鼠血液中的代謝、分布及藥代動力學(xué)，確定其代謝產(chǎn)物及有無H2S產(chǎn)生，并比較各大蒜含硫化合物在大鼠血液中代謝產(chǎn)生的H2S的量，進(jìn)一步闡明大蒜含硫化合物在體內(nèi)的作用是經(jīng)H2S介導(dǎo)的。
　　方法：采用鄰苯二甲醛(o-phthalaldehyde，OPA)-叔丁基硫醇柱前衍生高效液相熒

2、光法，結(jié)合清醒動物采血系統(tǒng)，研究蒜氨酸經(jīng)頸靜脈注射后在清醒大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)；建立HPLC-亞甲藍(lán)法，將蒜氨酸及系列濃度大蒜辣素、DAS、DADS、DATS，分別加入大鼠血細(xì)胞中，37℃孵育10min后，檢測各大蒜含硫化合物能否代謝為H2S，并比較產(chǎn)生的H2S的量；建立生物樣品中H2S含量測定的UPLC-MS/MS法，大蒜辣素經(jīng)小鼠尾靜脈注射后，不同時間點(diǎn)取血液及組織，通過測定各時間點(diǎn)血漿及組織中H2S的含量，研究大蒜辣素在小鼠的藥代

3、動力學(xué)及其在小鼠組織中的分布情況。
　　結(jié)果：1.大鼠以蒜氨酸50mg/kg頸靜脈注射給藥后，血漿中蒜氨酸的主要藥動學(xué)參數(shù)為K：0.02min-1，T1/2：34.62min，Cmax：96.51μg/mL，Tmax：5.00min，AUC(0-120min)：4004.63min·μg/mL，AUC(0-∞)：4347.93min·μg/mL，Vd：615.35mL/kg，CL：12.60mL/min/kg。2.HPLC-亞甲藍(lán)

4、法用于血液中H2S的測定專屬性較好，H2S的線性范圍為0.8~80μmol/L，定量限為0.8μmol/L。將大蒜含硫化合物加入大鼠血細(xì)胞中孵育10min后，除蒜氨酸外均可產(chǎn)生H2S。產(chǎn)生H2S效率依次為：DATS＞DADS=大蒜辣素＞DAS。3.UPLC-MS/MS法較HPLC-亞甲藍(lán)法靈敏度更高，可檢測到血液中內(nèi)源性H2S，H2S的線性范圍為0.15~9.60μmol/L，定量限為0.15μmol/L。預(yù)實(shí)驗時大蒜辣素經(jīng)小鼠尾靜脈注

5、射后，血漿樣品經(jīng)質(zhì)譜初步檢測，大蒜辣素、DAS、DADS和DATS均未檢測到，但衍生化后可檢測到H2S，因此以H2S為指標(biāo)進(jìn)行大蒜辣素藥代動力學(xué)及組織分布研究。大蒜辣素代謝產(chǎn)物H2S的主要藥動學(xué)參數(shù)為K：0.086min-1，T1/2：8.926min，Cmax：0.968μmol/L，Tmax：15.000min，AUC(0-45min)：375.617min·μg/mL，AUC(0-∞)：376.233min·μg/mL，Vd：38

6、08.050mL/kg，CL：320.561mL/min/kg。給藥后，小鼠血漿和各組織中H2S的含量均有增加，15min后達(dá)血藥濃度峰值，20min后各組織H2S含量也達(dá)最高值，H2S含量依次為：腎臟＞腦＞脾＞肝臟＞肺＞心，腎臟H2S增加了367.35％。
　　結(jié)論：本研究獲得的蒜氨酸的藥動學(xué)參數(shù)可用于后續(xù)蒜氨酸體內(nèi)分布、代謝等動力學(xué)及生物利用度的研究。大蒜含硫化合物體外實(shí)驗結(jié)果表明蒜氨酸在血液中不能代謝成H2S，而蒜氨酸與蒜酶