卵泡液sRAGE預(yù)測(cè)育齡期婦女卵巢儲(chǔ)備及對(duì)PCOS保護(hù)作用的研究.pdf

1、研究背景：
　　多囊卵巢綜合征(PCOS)至今發(fā)病機(jī)制不清，近期研究認(rèn)為慢性炎癥狀態(tài)參與其發(fā)生。因此從PCOS病因著手研究其發(fā)病機(jī)制、探索PCOS的治療靶點(diǎn)，是本課題的主要研究目的。
　　晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）是一組非酶促修飾的異質(zhì)性蛋白質(zhì)，作為AGEs受體的RAGE屬于免疫球蛋白超家族，通常在AGEs累積的情況下合成增加，導(dǎo)致細(xì)胞功能和代謝障礙，從而誘導(dǎo)病理過(guò)程導(dǎo)致疾病的發(fā)生?？扇苄酝砥谔腔K產(chǎn)物受體（sRAGE

2、）是RAGE的可溶性形式，因?yàn)槿狈ζ胀≧AGE胞內(nèi)段和跨膜結(jié)構(gòu)域，可抑制AGE-RAGE系統(tǒng)在體內(nèi)產(chǎn)生的不良影響。sRAGE不僅作為反映體內(nèi)病理變化的生物標(biāo)志物，也可作為多種疾病的保護(hù)因子。糖尿病患者sRAGE濃度降低，與胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)；肥胖患者體內(nèi)sRAGE水平明顯降低；隨著年齡的增長(zhǎng)，尤其是35歲之后，sRAGE水平明顯降低。
　　AGE-RAGE降低育齡期婦女卵巢功能的研究已經(jīng)達(dá)成共識(shí)，其對(duì)PCOS病理發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的促

3、進(jìn)作用近來(lái)也稱為研究熱點(diǎn)。sRAGE被認(rèn)為可以影響為卵泡發(fā)育微環(huán)境環(huán)境，作為育齡期婦女生育能力的標(biāo)記物。但也有學(xué)者認(rèn)為卵泡液中高度的sRAGE對(duì)可對(duì)卵泡和胚胎發(fā)育產(chǎn)生不良影響。在生殖領(lǐng)域，sRAGE與炎癥關(guān)聯(lián)也存在爭(zhēng)議。有學(xué)者認(rèn)為羊水中高濃度sRAGE與炎癥呈正相關(guān)，參與早產(chǎn)的發(fā)生。但也有學(xué)者認(rèn)為血液中高濃度sRAGE與炎癥因子負(fù)相關(guān)，能夠避免早產(chǎn)的發(fā)生。sRAGE與炎癥因子，胰島素抵抗與卵巢儲(chǔ)備功能都具有關(guān)聯(lián)性，而炎癥反應(yīng)，胰島素抵抗

4、和卵巢儲(chǔ)備能力低下是PCOS典型的臨床和病理特點(diǎn)。那么，sRAGE在PCOS的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演著什么的角色，可能的機(jī)制是什么？目前，sRAGE對(duì)卵巢儲(chǔ)備的預(yù)測(cè)能力存在爭(zhēng)議，其在PCOS發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用和機(jī)制尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　目的：
　　1.研究卵泡液中sRAGE對(duì)行體外受精-胚胎移植助孕的患者卵巢儲(chǔ)備能力及IVF結(jié)局的預(yù)測(cè)作用。
　　2探索PCOS患者卵泡液中sRAGE濃度與其妊娠結(jié)局相關(guān)系數(shù)的關(guān)聯(lián)，并從炎癥角度

5、探索sRAGE對(duì)PCOS的作用。
　　材料與方法：
　　第一部分實(shí)驗(yàn)包括對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組：對(duì)照組為因輸卵管阻塞患者35名；實(shí)驗(yàn)組為PCOS患者39名，用于卵泡液檢測(cè)；第二部分實(shí)驗(yàn)包括PCOS患者10名，用于顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)所用卵泡液均取自≥18mm的卵泡，超聲下取卵，取第一管清亮、無(wú)血染卵泡液1ml用于檢測(cè)sRAGE和TNF-α,IL-6,CRP的濃度。實(shí)驗(yàn)第二部分納入10例PCOS患者，提取顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)，添加sRA

6、GE干預(yù)，終濃度為0μg／ml，0.6μg／ml，1.2μg／ml。干預(yù)24小時(shí)和48h后，檢測(cè)TNF-αmRNA，IL-6mRNA，CRPmRNA和TNF-α，IL-6，CRP，RAGE，p-ERK，AP-1蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1.正常對(duì)照組患者卵泡液中高濃度sRAGE蛋白表達(dá)量預(yù)測(cè)本新鮮周期中較低的促性激素（Gn）總劑量(r=-0.328,P=0.041)、較高的取卵總數(shù)(r=0.488,P=0.005)和較

7、好的助孕結(jié)局(Oddsratio=1.014,P=0.039)。
　　2.PCOS組患者的卵泡液中sRAGE蛋白的表達(dá)量降低（666.753±233.153vs.1518.608±872.130,P=0.000）；卵泡液sRAGE表達(dá)量與本周期Gn總量負(fù)相關(guān)(r=-0.037,P=0.831)；對(duì)PCOS與對(duì)照組卵泡液sRAGE蛋白表達(dá)量進(jìn)行ROC分析示，敏感度0.971，特異性0.821。
　　3.PCOS組患者卵泡液中T

8、NF-α，IL-6，CRP因子較對(duì)照升高，并且和卵泡液中sRAGE蛋白量均負(fù)相關(guān)（TNF-α，r=-0.450,P=0.004；IL-6，r=-0.455,P=0.004；CRP，r=-0.375,P=0.019）；外源性sRAGE降低PCOS患者顆粒細(xì)胞中TNF-α，IL-6，CRP的轉(zhuǎn)錄和翻譯，抑制PCOS患者顆粒細(xì)胞中RAGE，p-ERK，AP-1的表達(dá)，并且有劑量依賴性和時(shí)間依賴性。
　　結(jié)論：
　　卵泡液sRAGE