白花蛇舌草化學(xué)成分研究.pdf

1、白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.)為茜草科耳草屬植物，全草入藥，產(chǎn)于江蘇、安徽、福建、浙江、廣西等地，夏、秋二季采收。性寒，味微苦、甘，用于治療癰腫瘡毒、毒蛇咬傷、咽喉腫痛等疾病。主成分為黃酮類、蒽醌類、環(huán)烯醚萜類化合物。其藥理活性的廣泛性已得到現(xiàn)代研究的證實(shí)，特別是其所具有的抗腫瘤和調(diào)節(jié)免疫活性，近年來受到密切關(guān)注。為合理開發(fā)利用白花蛇舌草藥材資源，本文在對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分離鑒定的基礎(chǔ)上，首次對(duì)白花蛇舌草中總

2、環(huán)烯醚萜成分做了提取工藝優(yōu)選的研究，并對(duì)白花蛇舌草藥材中6種主要成分做了定量分析研究，以期為進(jìn)一步明確其有效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量控制提供依據(jù)。
　　論文主要包括以下幾個(gè)部分:
　　1.文獻(xiàn)綜述
　　通過系統(tǒng)的查閱有關(guān)白花蛇舌草的國內(nèi)外文獻(xiàn)，對(duì)白花蛇舌草的化學(xué)成分、質(zhì)量分析、藥理作用、提取工藝及環(huán)烯醚萜類成分純化工藝方面的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。
　　2.白花蛇舌草化學(xué)成分分離鑒定
　　采用了硅膠、sephade

3、x LH-20、MCI、C18、 HPLC制備色譜等分離方法，從白花蛇舌草中分離得到20個(gè)化合物，根據(jù)波譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)共鑒定17個(gè)化合物:(E)-6-O-對(duì)香豆酰雞屎藤次苷甲酯(E)-6-O-p-coumaroyl scandoside methylester（化合物1）、(Z)-6-O-對(duì)甲氧基桂皮酰雞屎藤次苷甲酯(Z)-6-O-p-methoxycinnamoyl scandoside methyl ester（化合物2）、(E)

4、-6-O-對(duì)甲氧基桂皮酰雞屎藤次苷甲酯(E)-6-O-p-methoxy cinnamoyl scandoside methyl ester（化合物3）、雞屎藤次苷甲酯scandoside methyl ester（化合物4）、去乙酰車葉草酸甲酯deacetylasperulosidic acid methyl ester（化合物5）、2-甲基-3-羥基-4-甲氧基蒽醌2-rnethyl-3-hydro xy-4-methoxy-ant

5、hraq uino ne（化合物6）、槲皮素-3-O-[2-O-（6-O-E-芥子酰）-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷querc et in-3-O-[2-O-(6-O-E-s inapoyl)-β-D-glucopyranoside]-β-D-glucopyrano side（化合物7）、山奈酚-3-O-(2-O-β-D-葡萄糖-β-D-半乳糖苷kaemp ferol-3-O-(2-O-β-D-glucopyra nos i

6、de)-β-D-galactopyranoside（化合物8）、槲皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-阿可魏酰)-β-D-吡喃葡糖苷-β-D-吡喃葡糖苷quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-β-D-glucopyranoside]-β-D-glucopyranoside（化合物9）、齊墩果酸oleanicacid（化合物10）、山奈酚kaempferol(化合物11)、槲皮素quercetin（化合物

7、12）、對(duì)香豆酸p-coumaric acid（化合物13）、β-胡蘿卜苷β-daucosterol（化合物14）、二十四烷酸t(yī)etradecanoic acid(化合物15)、二十四烷醇乙酸酯tetracosanol acetate（化合物16）、四十一烷醇1-hentetracontanol（化合物17）。
　　3.白花蛇舌草中總環(huán)烯醚萜菅類成分的提取工藝研究
　　采用正交設(shè)計(jì)法進(jìn)行白花蛇舌草中總環(huán)烯醚萜苷類成分的提取工

8、藝優(yōu)選，以環(huán)烯醚萜苷含量和浸膏得率的綜合評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以分光光度法作為含量測(cè)定方法，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取次數(shù)、料液比和提取時(shí)間4個(gè)因素，每個(gè)因素選取3個(gè)水平，通過4因素3水平試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，確定最佳提取工藝為:稱取白花蛇舌草藥材粉末(過40目篩)50g，加入8倍量的90％乙醇溶液，回流提取2h，提取2次。在最佳工藝條件下進(jìn)行三批驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果顯示，平均得膏率為10.43％，RSD值為1.64％;總環(huán)烯醚萜苷含量均值為22.85％，

9、RSD值為1.80％。
　　4.白花蛇舌草中六種化學(xué)成分的HPLC含量測(cè)定
　　建立了白花蛇舌草中6個(gè)化學(xué)成分的HPLC-DAD含量測(cè)定方法，包括環(huán)烯醚萜類成分（去乙酰車葉草苷酸、車葉草苷），黃酮類成分（槲皮素、山奈酚）和蒽醌類成分（2-羥基-3-甲基-1-氧基蒽醌、2-羥基-3甲基蒽醌）。色譜條件:色譜柱為Kromasil C18(4.6mm×250mm，5μm)，以甲醇-乙腈-0.5‰磷酸為流動(dòng)相系統(tǒng)，檢測(cè)波長(zhǎng)為236，

10、367，274nm。考察了提取方式、提取溶劑、溶劑體積倍數(shù)、提取時(shí)間對(duì)樣品提取的影響，最終確定樣品溶液制備方法為:采用超聲提取的方式，以50倍量甲醇為提取溶劑，提取時(shí)間為45min。測(cè)定了10批不同產(chǎn)地藥材中6種成分的含量，結(jié)果顯示不同產(chǎn)地白花蛇舌草藥材中6種成分的含量存在差異，2種環(huán)烯醚萜類成分高于2種黃酮和2種蒽醌類成分。江蘇和河南產(chǎn)地白花蛇舌草藥材中2種環(huán)烯醚萜苷類成分含量較高，山東和內(nèi)蒙產(chǎn)地2種黃酮類成分含量較高，河南產(chǎn)地2種蒽