胡椒堿納米膠束與脂質(zhì)體的制備及其質(zhì)量評價.pdf

1、胡椒堿（Piperine，PIP）是常見的辛香料活性成分之一，目前主要作為常用的食材和辛香料食品添加劑應(yīng)用于釀酒和食品制造業(yè)。胡椒堿藥理學(xué)活性廣泛，如：鎮(zhèn)痛、抗炎、抗驚厥、抗腫瘤、抗氧化、降血脂等，但由于其存在溶解度低、生物利用度差等問題，故而在臨床領(lǐng)域的應(yīng)用受到了極大的阻礙。為此，本課題將納米膠束與脂質(zhì)體這兩種新型納米給藥系統(tǒng)分別運用于胡椒堿，以達到增溶、增加穩(wěn)定性與提高生物利用度的目的，從而提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的毒副作用，并

2、且對兩種增溶手段進行比較，為其在今后臨床的廣泛應(yīng)用提供借鑒。全文主要分為以下五個部分：
　　第一章綜述
　　本章綜述主要分為兩個部分，第一部分介紹了辛香料的研究概況及其活性成分增溶技術(shù)的研究進展，圍繞包合/包覆技術(shù)、固體分散技術(shù)、微乳、脂質(zhì)體以及納米技術(shù)等五個方面進行了綜述；第二部分闡述了辛香料難溶性活性成分—胡椒堿的理化性質(zhì)、藥理作用以及目前的制劑研究現(xiàn)狀。對辛香料現(xiàn)代制劑技術(shù)及其應(yīng)用研究的綜述為后續(xù)相關(guān)實驗的開展奠定了理

3、論基礎(chǔ)。
　　第二章處方前研究
　　本章建立了高效液相色譜法（HPLC）測定胡椒堿體外樣品中藥物含量的方法，并對其進行方法學(xué)驗證。此方法專屬性良好，線性范圍0.5-100μg/mL（n=3， R2=0.9997）；定量限為14 ng，檢測限為5 ng；樣品的日內(nèi)及日間精密度均小于2％。測定了胡椒堿在不同種溶出介質(zhì)中的平衡溶解度，結(jié)果顯示胡椒堿在水中的平衡溶解度最低，僅有20.21μg/mL，在pH1.2 HCl溶液與pH7.

4、4的磷酸鹽緩沖液中的溶解度雖略微高一點，但也只有36.12μg/mL與33.69μg/mL，這些結(jié)果都表明胡椒堿難溶于水，為后續(xù)的制劑開發(fā)等提供了參考依據(jù)。
　　第三章胡椒堿納米膠束的制備及其體外評價
　　本章首先利用薄膜分散法制備了胡椒堿載藥的磷脂-膽酸鈉-聚維酮三元混合納米膠束，并結(jié)合單因素與正交設(shè)計法對其處方進行優(yōu)化，得到最佳處方為：胡椒堿投藥量5 mg，藥脂比為1:80，膽酸鈉用量為0.3 g，PVP K-30用量為

5、0.4 g。其次，對按最佳處方制備的胡椒堿納米膠束進行了各項體外性質(zhì)評價，結(jié)果顯示胡椒堿納米膠束呈類球形均勻分布、粒徑較小，平均粒徑約為13.08±0.58 nm， Zeta電位為-22.33±2.73 mV，包封率高達89.81±1.53%。初步穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明胡椒堿納米膠束在60 ℃以下，30天內(nèi)具有良好的熱穩(wěn)定性。體外釋藥結(jié)果表明，在三種不同溶出介質(zhì)中，胡椒堿原料藥在72 h內(nèi)的累積釋藥率僅有60%左右，而胡椒堿納米膠束在72

6、h內(nèi)的釋藥度均大于95%，明顯高于原料藥，說明納米膠束對胡椒堿起到了良好的增溶作用。
　　第四章胡椒堿納米脂質(zhì)體的制備及其體外評價
　　本章采用磷脂、膽固醇為主要載體，同時加入膽酸鈉和肉豆蔻酸異丙酯，以薄膜分散-水合法制備了胡椒堿載藥的多相脂質(zhì)體，以單因素試驗及正交優(yōu)化設(shè)計對其進行處方篩選，得到最佳處方為：藥脂比為1:30，磷脂與膽固醇的比為6:1，IPM用量為0.5g，膽酸鈉用量為0.4g。對按照最佳處方制得的胡椒堿納米脂

7、質(zhì)體進行物理化學(xué)表征，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胡椒堿納米脂質(zhì)體呈類球形分布均勻，平均粒徑為86.85±1.4 nm，Zeta電位為-41.4±3.1 mV，包封率可達91.53±0.89%，且30天內(nèi)60 ℃以下穩(wěn)定性較好。胡椒堿體外釋放結(jié)果表明，所制備的納米脂質(zhì)體能夠顯著增大胡椒堿的體外釋藥量，72 h在水中最高可達94.03%。
　　第五章胡椒堿及其納米制劑大鼠腸吸收特性及體內(nèi)藥動學(xué)考察
　　本章以SD大鼠作為實驗動物模型，建立了高效

8、液相色譜法（HPLC）測定胡椒堿體內(nèi)樣品中藥物含量的方法，并對其進行方法學(xué)驗證。此方法專屬性良好，線性范圍50-2500 ng/mL（n=6，R2=0.9971）；樣品的日內(nèi)及日間精密度均小于4%；樣品回收率在98.77%-101.21%之間，RSD均<3%；檢測限為7 ng/mL，定量限為18 ng/mL。以自制的胡椒堿納米膠束及脂質(zhì)體作為受試制劑，以胡椒堿原料藥作為對照，對其進行大鼠在體腸吸收特性以及體內(nèi)藥物動力學(xué)的考察，結(jié)果顯示胡

9、椒堿納米膠束及脂質(zhì)體均能顯著提高藥物在大鼠體內(nèi)的腸吸收以及生物利用度。大鼠在體腸吸收實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同濃度的胡椒堿在小腸的三個腸段（十二指腸、空腸、回腸）均有吸收，但吸收存在顯著的差異，結(jié)果表明回腸為胡椒堿的最佳吸收部位，空腸及十二指腸次之；藥物濃度在10μg/mL時的回腸吸收百分率最大，但也僅有5.621%，說明胡椒堿原料藥在大鼠小腸的吸收較差；藥物濃度為5μg/mL、10μg/mL、15μg/mL的胡椒堿在回腸的吸收速率常數(shù)Ka值分別

10、為（0.0531±0.059）/h，（0.0598±0.055）/h及（0.0407±0.026）/h且數(shù)值間均具有顯著性差異，因而可根據(jù)其吸收速率常數(shù)的變化趨勢推測胡椒堿在大鼠小腸的吸收可能是被動擴散與主動轉(zhuǎn)運同時存在。此外，還發(fā)現(xiàn)相對于胡椒堿原料藥，不同濃度的胡椒堿納米膠束及脂質(zhì)體在小腸不同腸段的吸收均有明顯的提升，說明胡椒堿納米制劑可顯著提高大鼠小腸對胡椒堿的吸收。體內(nèi)藥動學(xué)研究結(jié)果表明，相對于胡椒堿原料藥（946.40 ng/m

11、L），48 h內(nèi)胡椒堿納米膠束及脂質(zhì)體的Cmax分別增加到1368.93ng/mL和2588.99 ng/mL，分別提高了1.45和2.74倍；胡椒堿納米膠束及脂質(zhì)體組的AUC0-48h分別為20336.41和51473.85 h·ng/mL，約為胡椒堿原料藥組（14157.01 h·ng/mL）的1.44和3.64倍；t1/2、MRT顯著延長，納米膠束及脂質(zhì)體口服給藥的半衰期 t1/2為原料藥的1.17-1.60倍， MRT為原料藥的