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1、目的:結(jié)合骨形態(tài)方面和基因?qū)W方面的改變,探討氟、鋁對(duì)大鼠脊柱的聯(lián)合毒性及可能的發(fā)生機(jī)制。
方法:將96只大鼠分成6組,分別為對(duì)照組、中氟組、高氟組、中氟鋁組、高氟鋁組、單純加鋁組,每組16只,雌雄各半,用含氟化鈉(NaF)的飼料及含氯化鋁(AlCl3)加鋁水連續(xù)飼喂大鼠6個(gè)月染毒,各組NaF、AlCl3染毒濃度分別為(0mg/kg,0mg/L)、(45mg/kg,0mg/L)、(110mg/kg,0mg/L)、(45mg/kg
2、,90mg/L)、(110mg/kg,90mg/L)、(0mg/kg,90mg/L)。處死大鼠前,觀察大鼠一般生長(zhǎng)狀況,搜集24h尿液,處死大鼠后留取脊柱、股骨;尿氟、骨氟均采用氟離子選擇電極法,尿鋁、骨鋁采用電感耦合等離子發(fā)射光譜法進(jìn)行測(cè)定;顯微CT觀測(cè)大鼠脊柱骨小梁改變;ELISA法檢測(cè)大鼠脊柱core binding factorα1(簡(jiǎn)稱Runx2)、osteoblast-specific transcription facto
3、r(簡(jiǎn)稱Osterix)蛋白表達(dá)水平;提取大鼠脊柱組織總RNA,實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測(cè)Runx2、Osterix mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:1.氟、鋁中毒動(dòng)物模型的建立:對(duì)照組和單純加鋁組大鼠無(wú)明顯氟斑牙發(fā)生,其余染氟組大鼠氟斑牙損傷程度隨染毒劑量的增加而加重;各染氟組大鼠的尿氟、骨氟濃度較對(duì)照組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);各加鋁組大鼠的尿鋁、骨鋁濃度較對(duì)照組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。結(jié)合氟斑牙損傷
4、情況和尿氟、骨氟、尿鋁、骨鋁等指標(biāo)可認(rèn)為本研究已成功建立了氟、鋁中毒動(dòng)物模型。2.顯微CT觀察大鼠脊柱骨小梁改變:比較各組間BMD、TMD、Tb.Th、Tb.Sp、Tb.N的改變,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);各染氟組DA、BS/BV較對(duì)照組下降,BV/TV較對(duì)照組升高,但各組間DA、BS/BV和BV/TV的比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。3.各染氟組與對(duì)照組相比Runx2、Osterix mRNA的表達(dá)增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意
5、義(P﹤0.05),單純加鋁組較對(duì)照組稍降低,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。各染毒組與對(duì)照組相比較Runx2蛋白含量增加,單純?nèi)痉M和氟鋁聯(lián)合染毒組與對(duì)照組相比,隨著染氟濃度的增加Runx2蛋白含量有增加的趨勢(shì),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);除中氟組外,各染毒組與對(duì)照組相比較Osterix蛋白含量降低(P﹤0.05)。
結(jié)論:1.成功建立氟/鋁中毒大鼠模型。2、氟可促進(jìn)大鼠體內(nèi)骨轉(zhuǎn)換的加速,使骨量增加,單純加氟組大鼠
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