強脊陽和湯對強直性脊柱炎骨保護作用的實驗研究.pdf

1、目的:
　　本課題將從強直性脊柱炎(ankylosing spondylitis，AS)的病理機制入手，通過觀察中藥復方強脊陽和湯對蛋白聚糖免疫的BALB/c小鼠血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)、核激活因子受體配體(RANKL)及骨保護素(OPG)表達的影響，并且通過小鼠關(guān)節(jié)的病理切片進行分析，探討強脊陽和湯治療AS及其骨保護的作用機制。
　　方法:
　　實驗動物選擇32只鼠齡4-

2、5周的雄性健康BALB/c小鼠，適應性喂養(yǎng)一周后，對當中24只進行造模（蛋白聚糖+弗氏佐劑造模），剩余8只小鼠為正常組，再將造模后的24只隨機分成模型組、柳氮磺胺吡啶組、強脊陽和湯組，每組8只。中藥予強脊陽和湯（鹿角片10g、熟地10g、生麻黃8g、桂枝10g、白芥子10g等）濃煎成含生藥7.54g/kg煎劑，0.2ml/10g/d灌胃治療，柳氮磺胺吡啶組予（0.02g/ml溶于生理鹽水中）0.2ml/10g灌胃，空白組與模型對照組予生

3、理鹽水0.2ml/10g/d治療。用藥90天后對小鼠眼眶取血，離心提取血清，采用Elisa檢測的方法分別分析血清中腫瘤壞死因子-α、MMP-3、RANKL及OPG的含量，頸椎脫離法將處死小鼠后，取脊柱、關(guān)節(jié)進行病理分析，HE染色并進行病理分析。
　　結(jié)果:
　　血清中TNF-α、MMP-3、RANKL、OPG含量結(jié)果:模型組與空白組比較，血清中TNF-α、MMP-3、RANKL均升高，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，OPG含

4、量降低，但與空白組無顯著差異。與模型組相比，強脊陽和湯組及柳氮磺胺吡啶片組小鼠血清中的TNF-α、MMP-3、RANKL含量均低于模型組，具有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)。而強脊陽和湯組與柳氮磺胺吡啶片組比較，均無顯著性差異。強脊陽和湯組及柳氮磺胺吡啶片組小鼠血清OPG含量均高于模型組，與模型組相比表現(xiàn)為明顯差異(P＜0.01或P＜0.05)。強脊陽和湯組與柳氮磺胺吡啶片組對比，均無顯著性差異。病理分析結(jié)果顯示強脊陽和湯能改

5、善其模型鼠關(guān)節(jié)軟骨破壞的程度。
　　結(jié)論:
　　1.強脊陽和湯可能通過降低TNF-α的表達，抑制其他炎性因子的產(chǎn)生，調(diào)節(jié)免疫應答，從而減緩炎性細胞浸潤，減輕炎癥發(fā)展。
　　2.強脊陽和湯能夠上調(diào)OPG含量，減少RANKL的表達，進而減少破骨細胞產(chǎn)生及分化，通過對RANKL系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，對骨破壞的發(fā)展起抑制作用，起到骨保護的作用。
　　3.強脊陽和湯能夠下調(diào)MMP-3含量，可能通過降低基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，阻斷其激活