羥基磷灰石涂層的鎂-釹-鋅-鋯合金促進骨再生的體內(nèi)外研究.pdf

1、目的：
　　1、明確合金及其涂層對MC3T3-E1細胞生物學(xué)行為的影響。
　　2、明確合金及其涂層植入體內(nèi)后的材料降解及成骨情況。
　　研究方法：
　　1、體外實驗通過采用空白組、鈦合金組、JDBM組、HA-JDBM組的浸提液培養(yǎng)MC3T3-E1細胞；采用CCK-8法檢測細胞增殖活力；流式凋亡法檢測細胞凋亡；免疫熒光檢測細胞骨鈣素(osteocalcin，OC)和轉(zhuǎn)錄因子RUNX2；RT-PCR檢測ALP、COL

2、 I、OC和OPN基因表達情況。
　　2、體內(nèi)實驗通過采用鈦合金組、JDBM組、HA-JDBM組3組材料固定大鼠脛骨骨折，通過苦味酸品紅染色觀察成骨情況；X線和Micro-CT掃描觀察植入材料降解和成骨情況。
　　結(jié)果：
　　1、HA-JDBM組的細胞活性最高，且在6d內(nèi)呈遞增趨勢。隨著培養(yǎng)時間的延長，ALP表達呈上升趨勢。JDBM組和HA-JDBM組ALP表達水平總體較空白組和Ti合金組高。
　　2、流式凋亡顯

3、示HA-JDBM組存活細胞比例最高，死亡和凋亡細胞比例最低，提示HA-JDBM具有良好的生物相容性。
　　3、免疫熒光顯示三組材料浸提液培養(yǎng)的細胞活性較好，未見明顯細胞紅染，HA-JDBM組細胞OC和RUNX2含量最高，細胞增殖密度最高。
　　4、qRT-PCR結(jié)果顯示了ALP、COL1、OC和OPN基因表達隨著時間延長呈現(xiàn)遞增趨勢，同一時間點HA-JDBM組基因表達最為顯著，空白組最低。
　　5、JDBM組形成皮下氣

4、腫，髓腔內(nèi)可見少量氫氣。4周時，JDBM組和HA-JDBM組骨折愈合速度快于Ti合金組。Micro-CT檢查發(fā)現(xiàn)6周時JDBM髓內(nèi)釘斷裂，說明過快的材料降解超過了骨折愈合所需時間，而Ti合金組和HA-JDBM組髓內(nèi)釘基本都能維持較好的完整形態(tài)，說明JDBM植入體內(nèi)后其降解速度快于HA-JDBM樣品。
　　6、苦味酸-品紅染色結(jié)果顯示JDBM組髓內(nèi)釘材料與新生骨間存在小間隙，而Ti合金組和HA-JDBM組未見明顯間隙。Ti合金組新生