18F-FDG micro PET-CT顯像觀察黃芪甲苷對大鼠腦缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：本研究擬用小動物PET/CT（micro PET/CT）探索腦缺血再灌注損傷（cerebral ischemic-reperfusion injury, CIRI）后予以黃芪甲苷治療后腦組織葡萄糖代謝變化情況，并與腦缺血再灌注后神經(jīng)功能評分進行比較分析，同時觀察腦組織及血清中炎癥因子IL-1β、TNF-α的變化情況，評估在治療腦缺血再灌注損傷中黃芪甲苷的臨床應(yīng)用價值，為臨床應(yīng)用黃芪甲苷治療腦缺血提供科學(xué)的實驗數(shù)據(jù)。方法：48只成年

2、健康雄性 SD大鼠，單純隨機分為假手術(shù)組（A組），腦缺血再灌注模型組（B組），黃芪甲苷低劑量治療組（C組），黃芪甲苷高劑量治療組（D組），每組12只大鼠。采用改良Longa的線栓法阻塞大腦中動脈（making middle cerebral artery occlusion，MCAO）制作大鼠腦缺血再灌注模型。模型組（B組）和治療組（C、D組）栓線插入右側(cè)頸內(nèi)動脈（internal carotid artery，ICA）的深度約為18m

3、m，60min后抽出栓線實現(xiàn)再灌注，假手術(shù)組（A組）在栓線插入頸內(nèi)動脈約10mm后即刻退出，余操作與腦缺血再灌注組相同。低劑量治療組（C組）在腦缺血再灌注模型建立成功后立即予以腹腔注射黃芪甲苷10mg/Kg/d連續(xù)治療14d，高劑量治療組（D組）在建模成功后立即予以腹腔注射黃芪甲苷20mg/Kg/d連續(xù)治療14d，假手術(shù)組（A組）與模型組（B組）在治療上不予任何處理。然后再將 A、B、C、D四組分別單純隨機分為兩組，各組6只大鼠，即A1

4、組、A2組、B1組、B2組、C1組、C2組、D1組、D2組。在A1組、B1組、C1組、D1組大鼠術(shù)后第1天、3天、7天、14天，參照Garcia評分系統(tǒng)，對大鼠進行神經(jīng)功能評分；于建模成功后第1天、7天、14天，給予A1組、B1組、C1組、D1組大鼠尾靜脈注入18F-氟代脫氧葡萄糖（18F-fluorodeoxyglucose，18F-FDG）約18.5MBq（500μCi）,30min后行micro PET/CT腦顯像，根據(jù)micro

5、 PET/CT圖像，測定缺血灶及周圍腦組織、對側(cè)腦組織及小腦的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)化攝取值（standardized uptake value， SUV），再計算靶組織/非靶組織的比值（target-to-nontarget ratio，T/NT）；再灌注24h后，用酶聯(lián)免疫吸附法測定A2組、B2組、C2組、D2組大鼠腦組織勻漿及尾靜脈血清的IL-1β、TNF-α水平。重復(fù)測量方差分析用于比較不同處理組各個時間點的神經(jīng)功能評分、葡萄糖代謝的差異；

6、單因素方差分析用于比較不同處理組腦組織、血漿中的IL-1β、TNF-α的差異；P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：實驗大鼠麻醉效果良好，成功造模。1.隨著時間的推移，各個組的神經(jīng)功能評分逐漸升高，神經(jīng)功能逐漸恢復(fù)。模型組（B1組）在第1d、3d、7d、14d的神經(jīng)功能評分均低于假手術(shù)組（A1組），P<0.01，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；低劑量治療組（C1組）的評分各個時間點均高于模型組（B1組）(P<0.01)，高劑量治療組（D1組）各個

7、時間點的評分均高于模型組（B1組）(P<0.01)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義；其中高劑量治療組（D1組）的評分與低劑量治療組（C1組）比較（P>0.05），無統(tǒng)計學(xué)差異。2. micro PET/CT顯像能夠很好的顯示腦缺血灶及周圍腦組織的葡萄糖代謝情況，腦缺血灶及周圍腦組織葡萄糖代謝是缺損、減低的。3. micro PET/CT圖像上觀察，模型組（B1組）的葡萄糖代謝低于假手術(shù)組（A1組）(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，在第1d、7

8、d、14d均較低；低劑量治療組（C1組）的葡萄糖代謝高于模型組（B1組）(P<0.05)，高劑量治療組（D1組）的葡萄糖代謝高于模型組（B1組）(p<0.05)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；其中高劑量治療組（D1組）的葡萄糖代謝與低劑量治療組（C1組）比較（P＞0.05），差異無統(tǒng)計學(xué)意義。4.模型組（B2組）大鼠腦組織及血漿中的 IL-1β、TNF-α的含量均高于假手術(shù)組（A1組）（P<0.05），治療組（C2組、D2組）的炎癥因子含量均較模