驅(qū)動蛋白KIF26B在結(jié)直腸癌中的表達、臨床意義和相關(guān)機制研究.pdf

1、研究目的：多種驅(qū)動蛋白與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切聯(lián)系，人們對于驅(qū)動蛋白KIF26B在腫瘤中的表達和相關(guān)機制知之甚少。本研究的目的在于探索驅(qū)動蛋白KIF26B在結(jié)直腸癌中的表達水平、臨床意義以及表達機制。
　　方法：1、我們在前期課題相關(guān)研究和生物信息學(xué)分析的基礎(chǔ)上，采用Real Time PCR和Western Blot實驗技術(shù)檢測KIF26B在40例結(jié)直腸癌手術(shù)標本及對應(yīng)正常粘膜中的表達水平。2、在含88例結(jié)直腸癌標本的組織芯片上

2、，通過免疫組化染色檢測 KIF26B的表達情況。探索 KIF26B的表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，Kaplan-Meier法分析KIF26B的表達與患者生存概率的關(guān)系，COX比例風(fēng)險回歸模型分析KIF26B表達與患者預(yù)后的關(guān)系。3、構(gòu)建KIF26B ShRNA慢病毒載體工具，獲得KIF26B穩(wěn)轉(zhuǎn)敲減的結(jié)直腸癌細胞系，采用Real Time PCR、 Western Blot、CCK-8、平板克隆形成、裸鼠成瘤等多種體外體內(nèi)實驗方法檢測 KI

3、F26B敲減對結(jié)直腸癌細胞生物學(xué)行為的影響。
　　結(jié)果：1、在40例結(jié)直腸癌組織樣本中有30例（75%）KIF26B mRNA的表達水平較正常組織明顯升高，Western Blot實驗結(jié)果顯示結(jié)直腸癌組織中 KIF26B蛋白表達水平較正常粘膜組織明顯升高（2.33±0.07 vs0.91±0.04，P<0.05）。2、免疫組化染色顯示KIF26B在結(jié)直腸癌組織中表達升高，與腫瘤大?。≒=0.020）、AJCC分期（P=0.018）

4、、T分期（P=0.026）、N分期（P=0.014）相關(guān)；生存分析顯示KIF26B表達高組總體生存率低于KIF26B低表達組；多因素回歸分析顯示KIF26B是結(jié)直腸癌患者不利預(yù)后的獨立影響因子。3、成功構(gòu)建了 KIF26B ShRNA表達質(zhì)粒，體內(nèi)外實驗中，敲減 KIF26B的表達能夠明顯抑制結(jié)直腸癌細胞的細胞增殖能力、克隆形成能力、裸鼠成瘤能力。
　　結(jié)論:結(jié)直腸癌組織中驅(qū)動蛋白KIF26B表達水平增高，與多種病理參數(shù)相關(guān)，KI