山柰酚對過敏性鼻炎體內外的影響及相關機制的實驗研究.pdf

1、背景與目的：過敏性鼻炎是一種常見的難治性的耳鼻咽喉科疾病，它所表現(xiàn)出來的臨床癥狀嚴重的影響著病人的生活質量。山柰酚是一種從姜科植物山柰以及檀香科植物百蕊草中所提取的天然黃酮類化合物，具有很強的抗炎和抗過敏效應。本次實驗旨在研究山柰酚對過敏性鼻炎體內外的影響，并探討其相關的作用機制。
　　方法：在體內，通過使用卵清蛋白OVA對豚鼠進行腹腔注射和局部滴鼻刺激建立豚鼠過敏性鼻炎模型，不同濃度的山柰酚（5 mg/kg、20 mg/kg）和

2、氯雷他定（2 mg/kg）分別對豚鼠進行灌胃給藥。通過記錄豚鼠的抓鼻和打噴嚏次數(shù)，評價豚鼠過敏性鼻炎的癥狀；HE染色觀察豚鼠鼻黏膜病理形態(tài)的改變及鼻黏膜中嗜酸性粒細胞的浸潤數(shù)量；通過豚鼠脾臟指數(shù)來確定豚鼠機體炎癥反應的狀況；ELISA法檢測豚鼠血清中組胺、IgE、IL-4、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的水平。在體外，利用MTT法檢測山柰酚對肥大細胞的細胞毒性作用，并確定山柰酚的給藥濃度。分別用化合物48/80和脂多糖（LP

3、S）刺激肥大細胞使肥大細胞處于致敏狀態(tài)，不同濃度的山柰酚（10、20、40μmol·L-1）作用于處于致敏狀態(tài)的肥大細胞，利用甲苯胺藍染色觀察肥大細胞的脫顆粒狀態(tài)；ELISA法檢測細胞上清液中組胺、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α的水平。Western blot檢測經不同濃度的山柰酚作用于LPS活化的肥大細胞后，胞質中p-IKKβ、IκBα、p-IκBα和胞核中NF-κB(p65)蛋白水平。
　　結果：在體內，山柰酚能明

4、顯改善豚鼠過敏性鼻炎的癥狀（P<0.05），降低血清中組胺、IgE、IL-4、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的水平（P<0.05）。然而，豚鼠的脾臟指數(shù)基本沒有改變(P>0.05)。在光鏡下觀察，山柰酚會明顯改善豚鼠鼻黏膜的病理形態(tài)和減少嗜酸性粒細胞的浸潤。在體外，根據(jù) MTT法的實驗結果，確定了山柰酚的給藥濃度范圍為5μmol·L-1到40μmol·L-1。山柰酚能夠改善致敏的肥大細胞脫顆粒的狀態(tài)，并且使處于致敏狀態(tài)的肥大