基于TLR4-NF-κB信號(hào)通路對(duì)加味澤瀉湯治療非酒精性脂肪肝機(jī)制的研究.pdf

1、目的:1.探討薛博瑜教授辨治非酒精性脂肪肝的思路。2.探討加味澤瀉湯對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠NAFLD模型的治療機(jī)制。
　　方法:1.導(dǎo)出薛博瑜教授2014年1月至2015年10月門(mén)診所診治的非酒精性脂肪肝醫(yī)案，采用數(shù)據(jù)處理平臺(tái)Medcase V3.2數(shù)據(jù)記錄挖掘系統(tǒng)對(duì)所收集的非酒精性脂肪肝醫(yī)案進(jìn)行頻數(shù)及關(guān)聯(lián)規(guī)則的統(tǒng)計(jì)分析，從癥狀、舌苔、脈象、證型、治法及用藥規(guī)律方面進(jìn)行挖掘。
　　2.SPF級(jí)大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、加味澤

2、瀉湯組、多烯磷脂酰膽堿(易善復(fù))組，分別以10％或45％高脂純化飼料喂養(yǎng)12周，構(gòu)建大鼠NAFLD模型。
　　3.加味澤瀉湯治療組及多烯磷脂酰膽堿治療組分別給藥4周，對(duì)照組及模型組則給相應(yīng)體積雙蒸水4周。
　　4.造模結(jié)束后采集各組大鼠靜脈血，分別檢測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氫酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血糖(G

3、LU)值。
　　5.HE觀察各組肝臟組織切片脂肪沉積程度。免疫組化檢測(cè)肝組織中TLR4的表達(dá)。
　　6.提取各組肝臟大鼠肝臟組織，以蛋白免疫印跡(Western-blotting)法檢測(cè)Toll樣受體4(TLR4)、髓樣分化因子88(MyD88)、核因子-κ B P65(NF-κ B P65)、P38絲裂原活化蛋白酶(P38 MAPK)、磷酸化的P38絲裂原活化蛋白酶(P-P38)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、半胱氨酸

4、蛋白水解酶-1(Caspase-1)在組織中的表達(dá)量。
　　結(jié)果:1.本次數(shù)據(jù)挖掘研究共收集醫(yī)案73例，臨床癥狀中“乏力”出現(xiàn)頻次最高;證型以“濕熱蘊(yùn)結(jié)、肝郁脾虛、肝腎虧虛”為主;治療方法以“疏肝清化、健脾清化、養(yǎng)陰清化”為主;常用藥物有“炒白術(shù)、垂盆草、赤芍、廣木香、白芍”等。
　　2.與空白對(duì)照組相比，模型組大鼠AST值組增高，P＜0.05，ALT、TC值則增高顯著P＜0.01，而TG值雖有上升，但各組之間并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

5、;模型組HDL-C較空白對(duì)照組降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;兩治療組AST、TG值與模型組比較均有所下降P＜0.05;兩治療組ALT、TC、LDL-C值與模型組比較具有顯著下降趨勢(shì)，P＜0.01;兩藥物干預(yù)組的GLU水平較模型組雖有所下降、HDL-C水平有所增加，但數(shù)據(jù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3.與空白對(duì)照組相比，模型組TLR4、MyD88、NF-κB P65、P-P65、P38 MAPK、P-P38、JNK及Caspase-1的

6、表達(dá)量增高(TLR4 P＜0.05，余P＜0.01);加味澤瀉湯及多烯磷脂酰膽堿兩治療組上述蛋白的表達(dá)量較模型組均顯著下降(MyD88、P38 MAPK P＜0.05，余P＜0.01)。免疫組化結(jié)果中TLR4的表達(dá)量趨勢(shì)與WB結(jié)果一致。
　　結(jié)論:1.薛博瑜教授辨治非酒精性脂肪肝重視痰濕瘀滯的病機(jī)，治法以清化濕熱，健脾疏肝益腎為主。
　　2.加味澤瀉湯對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠NAFLD模型有良好的治療效果。其治療機(jī)制可能是通過(guò)抑