6周跑臺運動聯(lián)合小球藻對高脂膳食大鼠肝臟脂毒性影響的實驗研究.pdf

1、研究目的：采用動物實驗法，通過對實驗大鼠Lee’s指數(shù)，血漿FFA、IL-6水平變化，以及肝臟FFA、IL-10含量和Chemerin/CMKLR1-mRNA表達水平及KCs浸潤情況的比較與分析，探討高脂膳食對大鼠肝細胞的脂毒性作用以及6周跑臺運動聯(lián)合小球藻對高脂膳食大鼠肝細胞的保護作用。
　　研究方法：健康清潔級SD大鼠46只，8周齡，體重200g±20g克，實驗前以普通飼料適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為5組：普通膳食組（N=10，C

2、組）；高脂膳食組（N=10，H組）；高脂膳食運動組（N=10，HE組）；高脂膳食小球藻組（N=8，HL組）和高脂膳食運動聯(lián)合補充小球藻組（N=8，HEL組）。C組普通飼料喂養(yǎng)；其余各組高脂飼料喂養(yǎng)；HE、HEL組有氧運動采用0坡度跑臺，第一周15m/min，第二周20m/min，以后每周增加1m/min。運動50min/次，1次/天，6次/周，共6周，運動時間：21:00-24:00。HL、HEL組按20mg/kg體重灌胃補充小球藻，其

3、余各組生理鹽水等體積灌胃。灌胃時間：運動前半小時。每周測試并記錄體重體長數(shù)據。第六周末，最后一次運動后各組禁食12小時后大鼠尾靜脈取血測空腹血糖，麻醉下心尖采血分離血漿經3000rpm離心30min后取上清液置于凍存管-80℃冰箱中儲存待測；迅速摘取肝臟，分別放入液氮和福爾馬林液保存待用。ELISA法測血漿IL-6、FINS、FFA和肝臟勻漿IL-10、FFA水平；PCR技術檢測CMKLR1-mRNA表達水平；Western blot技

4、術檢測Chemerin蛋白表達水平；大鼠肝臟組織切片HE染色觀察KCs浸潤情況。運用SPSS17.0軟件處理測試所獲數(shù)據。
　　研究結果：1.與C組相比，H組大鼠Lee’s指數(shù)、血漿FFA和IL-6含量、肝臟FFA、IL-10含量顯著升高（P<0.05、P<0.01）、Chemerin/CMKLR-mRNA表達明顯上調（P<0.05）。
　　2. H組大鼠肝臟組織HE染色出現(xiàn)彌漫性、小泡樣脂肪變以及庫普弗細胞浸潤。HOMA-

5、IR有所升高，但無顯著意義（p>0.05）。
　　3. HE、HL、HEL組大鼠血漿FFA含量、HOMA-IR和HL、HEL組大鼠血漿IL-6含量明顯低于H組（p<0.01），有氧運動、補充小球藻對血漿FFA和IL-6有顯著的交互作用（p<0.05），即在相同運動條件下，補充小球藻對抑制血漿FFA和IL-6含量有顯著作用（p<0.01）；但兩者對HOMA-IR的影響無交互作用（p>0.05）。
　　4. HE、HL、HEL組

6、大鼠肝臟FFA含量和Chemerin/CMKLR-mRNA表達水平明顯低于H組（p<0.01）、IL-10含量雖有升高但無顯著性意義（p>0.05）；有氧運動、補充小球藻對肝臟FFA和IL-10含量的變化無交互作用（p>0.05）；對抑制肝臟Chemerin/ CMKLR-mRNA表達有顯著交互作用（p<0.05），即在同時補充小球藻情況下，有氧運動可有效抑制Chemerin/CMKLR-mRNA的上調表達（P<0.05）。
　　

7、5.HE、HL、HEL組肝臟組織HE染色，小泡樣脂肪變程度減輕。
　　研究結論：1.6周高脂膳食大鼠 Lee’s指數(shù)增加，血漿 FFA、IL-6水平以及HOMA-IR呈不同程度的升高，發(fā)生機體脂毒性、肥胖炎癥反應和胰島素抵抗。
　　2.6周高脂膳食導致大鼠肝臟FFA、IL-10濃度升高、肝細胞脂肪變性、KCs浸潤和Chemerin/CMKLR1-mRNA表達上調，出現(xiàn)肝臟脂毒性和炎癥反應。
　　3.6周有氧運動、補充小