內(nèi)臟痛高敏感幼鼠的學(xué)習(xí)記憶能力變化和脊髓背角、海馬CA1區(qū)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)變化及意義.pdf

1、第一部分內(nèi)臟痛高敏感模型幼鼠脊髓背角腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)變化及意義
　　目的：采用新生期母嬰分離建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，探討脊髓背角腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)的表達(dá)和幼鼠內(nèi)臟痛敏感性增高的關(guān)系。
　　方法：32只新生SD大鼠按2×2析因設(shè)計(jì)隨機(jī)分成4組，每組8只。分別為M1C1組、M1C0組、M0C1組、 M0C0組。M1C1組：給予新生期母嬰分離(NMS)建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，并在50日齡時(shí)接受結(jié)直腸擴(kuò)張(CR

2、D)刺激；M1C0組：同樣給予NMS建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，但在50日齡時(shí)不接受CRD刺激；M0C1組：不給予NMS，但在50日齡時(shí)接受CRD刺激；M0C0組：既不給予NMS，50日齡時(shí)也不接受CRD刺激。M1C1組、M0C1組在接受CRD刺激后次日和M1C0組、M0C0組幼鼠一起處死，留取L6～S2脊髓，采用SABC免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組幼鼠脊髓背角BDNF表達(dá)情況。
　　采用SPSS18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，α=0.05

3、為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)
　　結(jié)果：隨著CRD壓力的增加，腹外斜肌放電幅值增加；在CRD為15mmHg、30mmHg、45mmHg低擴(kuò)張壓刺激下，M1C1組腹外斜肌放電幅值顯著高于M0C1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，當(dāng)CRD為60mmHg、75mmHg高擴(kuò)張壓刺激時(shí)，兩組幼鼠腹外斜肌放電幅值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。M1C1組、M0C1組、M1C0組及M0C0組幼鼠脊髓背角BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比(IHS值)分別為32.25％(5.79)、31.18%

4、(5.21)、32.25%(5.64)、24.50%(4.64)，析因方差分析顯示：新生期母嬰分離可以導(dǎo)致幼鼠脊髓背角BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比(IHS值)明顯增加，單次CRD不能影響幼鼠脊髓背角BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比(IHS值)的表達(dá)，新生期MS和單次CRD刺激二者不存在交互作用。
　　結(jié)論：新生期MS可建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，其原因可能與脊髓背角BDNF過(guò)度表達(dá)相關(guān)。
　　第二部分內(nèi)臟痛高敏感模型幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力變化及

5、海馬CA1區(qū)BDNF表達(dá)改變
　　目的：采用新生期母嬰分離建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，探討內(nèi)臟痛敏感性增高幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力和海馬CA1區(qū)BDNF的表達(dá)變化。
　　方法：32只新生SD大鼠隨機(jī)分成兩組，每組16只，分別為M1組和M0組。M1組給予新生期母嬰分離(NMS)建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，M0組不給予NMS。在幼鼠35日齡時(shí)，兩組同時(shí)接受Morris水迷宮檢測(cè)。待幼鼠50日齡時(shí)，再根據(jù)是否接受結(jié)直腸擴(kuò)張(CRD)刺激將SD

6、大鼠分成4組，每組8只。分別為M1C1組、M1C0組、M0C1組、 M0C0組。M1C1組：給予NMS建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，并在50日齡時(shí)接受結(jié)直腸擴(kuò)張(CRD)刺激；M1C0組：同樣給予NMS建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，但在50日齡時(shí)不予CRD刺激；M0C1組：不予NMS，在50日齡時(shí)接受CRD刺激；M0C0組：不予NMS，50日齡時(shí)不予CRD刺激。M1C1組、M0C1組在接受CRD刺激后次日和M1C0組、M0C0組幼鼠一起處死，留

7、取海馬，采用SABC免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組幼鼠海馬CA1區(qū)BDNF表達(dá)情況。
　　結(jié)果：隨著Morris水迷宮訓(xùn)練次數(shù)的增加，定位航行試驗(yàn)的潛伏期和總路程明顯減少，同一日期模型組幼鼠和對(duì)照組相比，潛伏期及總游泳路程差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；空間探索實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，模型組幼鼠“原平臺(tái)象限游泳路程/總路程”和“原平臺(tái)穿越時(shí)間/總時(shí)間”和“穿越平臺(tái)次數(shù)”明顯較少，分別為：2.29、25.60%、25.60%，3.53、29.

8、30%、30.14，兩組差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。M1C1組、M0C1組、M1C0組及M0C0組幼鼠海馬CA1區(qū)BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比(陽(yáng)性細(xì)胞IHS值)分別為26.47%(5.50)、40.41%(3.58)、33.86%(5.57)、42.25%(7.28)，新生期MS建立的內(nèi)臟痛高敏感幼鼠海馬CA1區(qū)BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比和陽(yáng)性細(xì)胞IHS值明顯下降。
　　結(jié)論：新生期母嬰分離在導(dǎo)致幼鼠內(nèi)臟痛敏感性增高的同時(shí)，出