銀杏葉提取物注射液多組分測定及成品輸液的穩(wěn)定性研究.pdf

1、銀杏葉提取物(Ginko Biloba Extract，GBE)是以銀杏Ginkgo biloba L.的干燥葉為原料，采用適當(dāng)?shù)娜軇?，提取的有效成分富集的一類產(chǎn)品。
　　銀杏落葉喬木，可高達(dá)四十米。樹干筆直挺立，其有灰白顏色的樹皮。樹枝有長、短兩種，葉片形狀像把扇子。在中國很多省份都可見到它的分布，具有許多的藥用價(jià)值，在現(xiàn)存最早的中藥學(xué)專著《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有相關(guān)描述，寫道有“濕潤肺部、平喘息、止咳嗽等”。而在李時(shí)珍的《本草綱目

2、》中也有“定喘止咳”、“止帶濁”、“縮小便”和“通淋功效”等相關(guān)記載。
　　從中成藥心血管疾病用藥數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，銀杏制劑市場占有率居心血管內(nèi)科首位，遠(yuǎn)遠(yuǎn)領(lǐng)先于其余品種。這類制劑對心腦血管疾病有很顯著的療效。目前，銀杏葉的藥理作用得到了來自全世界各地的、許多專家得關(guān)注，他們對其進(jìn)行了大批的研究、考察，發(fā)現(xiàn)黃酮類和萜類內(nèi)酯類物質(zhì)是它的主要有效活性物質(zhì)。銀杏葉提取物可以在具有改善人體動脈血管的栓塞，增加紅細(xì)胞的攜帶氧氣能力，從而達(dá)到改善

3、心肌復(fù)蘇的功效。觀察我院臨床患者用藥記錄，發(fā)現(xiàn)相關(guān)不良反應(yīng)時(shí)有發(fā)生。分析原因?yàn)楦鱾€(gè)廠家的銀杏葉原材料的來源、產(chǎn)地、采摘和加工提取比較混亂，生產(chǎn)條件和生產(chǎn)工藝也沒有統(tǒng)一規(guī)范的標(biāo)準(zhǔn)。
　　第一部分采用UPLC-MS/MS測定9種銀杏葉提取物注射液中有效成分的含量
　　目的：首次建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測定三個(gè)不同廠家的銀杏葉提取物注射液（金納多、舒血寧和悅康通）中：水仙苷（Narcotic glycosides）、蘆丁

4、（Rutin）、山柰酚（Kaempferol）、槲皮素（Quercetin）、異鼠李素（Isorhamnetin）、銀杏內(nèi)酯A（Ginkgolide A）、銀杏內(nèi)酯B（Ginkgolide B）、銀杏內(nèi)酯C（Ginkgolide C）、白果內(nèi)酯（Ginkgolide）9種主要活性成分的含量。
　　方法：采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。色譜柱為PhenomenexKenetix C18柱（50 mm×3 mm,5μm），色譜柱的溫度

5、為室溫；流動相為甲醇-水，均含0.1％甲酸，梯度洗脫，流速為0.3 mL/min；以ESI源進(jìn)行MRM模式，定量分析，源噴射電壓為4500 V，離子源溫度是600℃。檢測離子對銀杏內(nèi)酯A（407.1/351.1），銀杏內(nèi)酯B（423.1/367.3），銀杏內(nèi)酯C(439.1/383.3)，白果內(nèi)酯(325/163)，槲皮素(301.1/150.9)，異鼠李素(315/300)，山柰酚(285.3/117)，蘆丁(609.1/300)，水

6、仙苷(623.1/315.1)。
　　結(jié)果：分析時(shí)間內(nèi)9種有效成分完全分離；9種物質(zhì)的相關(guān)系數(shù)（r均≥0.9973）；精密度RSD為1.1%~1.9%(n=6)；12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好；實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好；加樣回收率為95.44%~103.5%。
　　結(jié)論：該研究方法重復(fù)性良好、有較高的精密和回收率。簡便、快速，該方法可用于銀杏葉提取物注射液的含量測定。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，三個(gè)生產(chǎn)廠家的銀杏葉提取物注射液的9種成分中，只有槲皮素沒

7、有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其余8種成分均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　第二部分銀杏葉提取物注射液三個(gè)不同廠家的成品輸液的穩(wěn)定性研究
　　目的：考察3個(gè)不同廠家（悅康藥業(yè)、神威藥業(yè)和臺灣濟(jì)生藥業(yè)）的銀杏葉提取物注射液與兩種溶媒（氯化鈉溶液和葡萄糖溶液）配伍后在不同時(shí)間和不同條件（常溫、高溫和光照）下的穩(wěn)定性。
　　方法：銀杏葉提取物注射液與2種溶媒配伍后，分為常溫組、高溫組及光照組，考察各成品輸液的外觀、不溶性微粒、pH及黃

8、酮類化合物含量變化，其中外觀、不溶性微粒按2015版《中國藥典》第四部通則項(xiàng)下特性檢查法進(jìn)行檢測，黃酮類化合物含量采用HPLC-UV法測定。
　　結(jié)果：成品24h澄清，無明顯渾濁和沉淀，色澤無明顯變化，黃色澄清液，pH值和微粒值無明顯變化；以5%葡萄糖注射液做為溶媒的pH值較0.9%氯化鈉注射液偏低，但都符合成品輸液的pH要求；各成品輸液中的槲皮素、異鼠李素在24h內(nèi)含量基本保持不變，神威藥業(yè)的山柰酚含量較其他兩個(gè)廠家偏高，但都在